乙型肝炎病毒3022~1787核苷酸缺失突变体编码蛋白具有抗α干扰素作用 |
| |
作者姓名: | 王林 郭丹华 焦伯延 林万松 林建银 林旭 |
| |
作者单位: | 福建医科大学分子医学中心,福建省高校感染与肿瘤重点实验室,福州,350004;福建医科大学分子医学中心,福建省高校感染与肿瘤重点实验室,福州,350004;福建医科大学分子医学中心,福建省高校感染与肿瘤重点实验室,福州,350004;福建医科大学分子医学中心,福建省高校感染与肿瘤重点实验室,福州,350004;福建医科大学分子医学中心,福建省高校感染与肿瘤重点实验室,福州,350004;福建医科大学分子医学中心,福建省高校感染与肿瘤重点实验室,福州,350004 |
| |
基金项目: | 国家自然科学基金,福建省高等学校科技创新团队培育计划 |
| |
摘 要: | 为证实乙型肝炎病毒( HBV) 3022 ~1787 核苷酸缺失突变体编码蛋白TS′X′( 源于DNA 聚合酶读码框架, T为TP 区, S′为部分缺失的spacer 区, X′为截短的X 蛋白) 具有抗α干扰素( IFN-α) 作用并确定其功能区域, 用聚合酶链反应( PCR) 扩增获得TS′X′全长及片段TS′( 含TP 区及部分缺失的spacer 区) , 并克隆于pcDNA3. 1 /HisC 载体。重组质粒以FuGENE6 转染Huh7 肝细胞,48 h 后裂解细胞, 以蛋白质印迹法( Western blot) 证实目的蛋白可在Huh7 肝细胞中表达。重组质粒及空载体pcDNA3. 1 /HisC 分别与IFN-α反应报告质粒p6-16CAT按分子数5∶1、10∶1、15∶1、30∶1 共转染Huh7 肝细胞, 转染后48 h 给予终浓度为100 IU/ml 的IFN-α2a 刺激, 作用24 h 后裂解细胞, 用酶联免疫吸附试验( ELISA) 检测胞内氯霉素乙酰基转移酶( CAT) 含量。结果显示, 与空白载体相比, 随着TS′X′及TS′重组表达质粒转染量的递增, Huh7 胞内CAT 值逐渐降低( n=6, P <0. 05) , 但TS′X′与TS′之间无显著差异( n =6, P >0. 05) 。本研究证实, HBV 3022 ~1787 核苷酸缺失突变体编码的TS′X′蛋白可抑制Huh7 细胞对IFN-α的反应性, 其活性与其N端TP及部分缺失的spacer 区有关。
|
关 键 词: | 乙型肝炎病毒 末端蛋白 缺失突变 α干扰素 |
本文献已被 维普 万方数据 等数据库收录! |
| 点击此处可从《微生物与感染》浏览原始摘要信息 |
|
点击此处可从《微生物与感染》下载免费的PDF全文 |
|