用基于TaqMan探针的Real-timePCR技术定量检测副溶血弧菌

副溶血弧菌是一种引起食源性疾病的重要病原菌，传统的鉴定方法费时费力且容易出现假阴性，建立一种定量检测副溶血弧菌基因的方法尤为重要。根据GenBank公布的副溶血弧菌的gyrB基因序列设计一对引物和TaqMan探针，建立了基于TaqMan探针的Realtime PCR方法。通过对9种细菌（12株菌株）的DNA进行扩增，结果所有4株副溶血弧菌均可产生扩增曲线，其他8株非副溶血弧菌均不产生扩增曲线，证明了引物和探针具有很高的特异性。细菌纯培养物品和人工布菌的检测敏感度分别为1 CFU/ PCR反应体系和10 CFU/PCR反应体系，相关系数均为0.99（r2＝0.99），整个试验可在1h内完成。建立的方法可用于海产品中副溶血弧菌的快速定量检测。