| 滇龙胆GrHMA基因的克隆和原核表达 |
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| 引用本文： | 王彩云,李富生,李涛,李彩霞,张晓东,王元忠. 滇龙胆GrHMA基因的克隆和原核表达[J]. 生命科学研究, 2014, 0(3): 211-217 |
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| 作者姓名： | 王彩云 李富生 李涛 李彩霞 张晓东 王元忠 |
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| 作者单位： | 云南农业大学农学与生物技术学院;玉溪师范学院资源与环境学院;云南省农业科学院药用植物研究所; |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(81260608);云南省教育厅科学研究基金重点项目(2013Z075);科技部“十二五”国家科技支撑计划项目(2011BAI13B02-04) |
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| 摘 要： | HMA蛋白(heavy metal transporting ATPase)是一种在植物中广泛存在的多功能蛋白。根据滇龙胆转录组GrHMA基因序列,设计特异性引物,通过RT-PCR扩增GrHMA基因序列,并进行TA克隆、测序及序列分析;构建原核表达载体pGEX-4T-1-GrHMA,转入E.coli Rosetta(DE3)中,并在37℃、1.0 mmol/L IPTG下成功诱导表达。序列分析表明,GrHMA基因是HMA超家族的成员;GrHMA氨基酸序列系统发育分析表明,GrHMA与TcHMA处于同一进化枝。SDS-PAGE结果表明所表达蛋白与预期蛋白大小一致。这些结果为GrHMA蛋白的进一步纯化及结构和功能的研究奠定基础。
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| 关 键 词： | 滇龙胆 GrHMA基因 克隆 原核表达 |
Cloning and Prokaryotic Expression of GrHMA Gene in Gentiana rigescens |
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