琥珀酸弧菌L-天门冬酰胺酶基因的初级克隆和表达

本文以表达型噬菌体λgtll为载体，以及¹²⁵I标记的放射免疫抗体为探针，从EcDR I酶切的琥珀酸弧菌(Vyibrto succinogenes)染色体DNA片段中克隆得到携带天门冬酰胺酶基因的目的片段，在宿主菌E．Coil Y 1090 中得到表达。经酶解和凝胶电泳分析表明该插入DNA片段的分子量为5．8kb．重组DNA感染另一宿主菌E．ColiYl089后所产生的酶蛋白具有L-天门冬酰胺酶活力。用重组DNA(λgt11-AS8)为探针进行southern DNA杂交，琥珀酸弧菌染色体DNA的Ec0R I酶切片段中，出现一条位置在5．8kb处的杂交带，证明我们克隆到的携带L-天门冬酰胺酶基因的目的片段来自琥珀酸弧菌。