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琥珀酸弧菌L-天门冬酰胺酶基因的初级克隆和表达
作者姓名:关颖谦 陈剑民 彭惠林 何云生 焦瑞身 黄英星
作者单位:中国科学院上海植物生理研究所,上海;美国北卡罗里那大学肿瘤中心
摘    要:本文以表达型噬菌体λgtll为载体,以及125I标记的放射免疫抗体为探针,从EcDR I酶切的琥珀酸弧菌(Vyibrto succinogenes)染色体DNA片段中克隆得到携带天门冬酰胺酶基因的目的片段,在宿主菌E.Coil Y 1090 中得到表达。经酶解和凝胶电泳分析表明该插入DNA片段的分子量为5.8kb.重组DNA感染另一宿主菌E.ColiYl089后所产生的酶蛋白具有L-天门冬酰胺酶活力。用重组DNA(λgt11-AS8)为探针进行southern DNA杂交,琥珀酸弧菌染色体DNA的Ec0R I酶切片段中,出现一条位置在5.8kb处的杂交带,证明我们克隆到的携带L-天门冬酰胺酶基因的目的片段来自琥珀酸弧菌。

关 键 词:弧菌 L-天门冬酰胺酶 载体λglll 基因克隆和表达
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