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HBV PreS2 S/IFN-α融合基因真核表达载体的构建及其表达
作者单位:第四军医大学唐都医院感染科 陕西西安710038 (陈红梅,白雪帆,潘蕾,李光玉,韦三华),第四军医大学唐都医院感染科 陕西西安710038(黄长形)
摘    要:构建含HBVPrdS2 S和IFN α融合基因的真核表达载体pcDNA3.1.S2S/IFN α并在真核细胞中进行表达。应用重叠延伸剪切技术 (splicingbyoverlappingextension ,简称SOE)经两次PCR获得嵌合基因片段S2S/IFN α ,回收后直接克隆到 pcDNA3.1V5 /HisTOPOTA克隆载体 ,得到真核重组载体pcDNA3.1.S2S/IFN α。然后用脂质体法转染VeroE6细胞。对重组载体进行了限制性酶切及PCR鉴定 ,证明连接正确 ;经间接免疫荧光检测证实该重组载体能在真核细胞中表达插入的外源性基因编码的融合蛋白。真核表达载体pcDNA3.1.S2S/IFN α的成功构建及在VeroE6细胞中的有效表达 ,为进一步探讨HBV感染的特异性免疫治疗提供了实验依据

关 键 词:乙型肝炎病毒  α干扰素  融合基因  基因表达
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