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利用乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA构建慢性乙型肝炎病毒感染的小鼠模型
引用本文:严磊,赵婷婷,王会娟,李小松,黄爱龙,谭毅,赖国旗. 利用乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA构建慢性乙型肝炎病毒感染的小鼠模型[J]. 四川动物, 2015, 0(2): 200-207
作者姓名:严磊  赵婷婷  王会娟  李小松  黄爱龙  谭毅  赖国旗
作者单位:重庆医科大学实验动物中心;重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室
基金项目:重庆市科委重大项目(CSTC2013yykfc1005)
摘    要:目的通过水动力法注射乙型肝炎病毒(HBV)共价闭合环状DNA(cccDNA)构建C57BL/6小鼠慢性乙型肝炎病毒感染的模型。方法取29只C57BL/6小鼠,分为实验组、对照组和空白组,应用水动力法分别注射HBV cccDNA、pAAV-HBV1.2及等渗盐水,于注射后收集不同时间点的血清和肝组织。利用放射免疫法检测血清样本中乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg);荧光定量PCR检测血清和肝组织中HBV DNA拷贝数;免疫组织化学法检测肝组织中HBsAg和乙型肝炎病毒核心抗原(HBc Ag)的表达;苏木精-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化;使用SPSS 17.0对数据进行统计学分析。结果实验组HBsAg和HBeAg表达均呈现4个上升-下降曲线:HBsAg峰值分别出现在第3天、第3周、第7周和第9周;HBeAg峰值分别出现在第1天、第1周、第4周和第10周。对照组HBsAg和HBeAg表达分别呈现2个或3个明显的峰:HBsAg峰值分别出现在第3天和第8周;HBeAg峰值分别出现在第1天、第3周和第10周。空白组未检测出HBsAg和HBeAg。实验组HBV DNA拷贝数高于对照组的拷贝数(P<0.01);肝组织中HBV DNA拷贝数高于同期血清中的拷贝数(P<0.01);实验组和对照组的肝组织中均有HBsAg和HBc Ag的表达;实验组与对照组出现肝脏细胞炎症、肝细胞纤维化、肝细胞坏死等病理变化,而空白组正常。结论利用水动力法向C57BL/6小鼠体内转入HBV cccDNA,成功建立了慢性乙型肝炎病毒感染的小鼠模型,与对照组比较,新建立的小鼠乙肝模型具有更高的HBV表达,动物模型为研究乙型肝炎病毒HBV cccDNA的感染及其引起肝损伤的机制奠定了基础。

关 键 词:乙型肝炎病毒  HBV共价闭合环状DNA  水动力法  小鼠模型

Establishment of Hepatitis B Virus Chronic Infection Mouse Model Induced by HBV cccDNA
YAN Lei;ZHAO Tingting;WANG Huijuan;LI Xiaosong;HUANG Ailong;TAN Yi;LAI Guoqi. Establishment of Hepatitis B Virus Chronic Infection Mouse Model Induced by HBV cccDNA[J]. Sichuan Journal of Zoology, 2015, 0(2): 200-207
Authors:YAN Lei  ZHAO Tingting  WANG Huijuan  LI Xiaosong  HUANG Ailong  TAN Yi  LAI Guoqi
Affiliation:YAN Lei;ZHAO Tingting;WANG Huijuan;LI Xiaosong;HUANG Ailong;TAN Yi;LAI Guoqi;Laboratory Animal Center,Chongqing Medical University;Key Laboratory of Molecular Biology on Infection Diseases and Institute for Viral Hepatitis,Chongqing Medical University;
Abstract:
Keywords:
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