人b干扰素与人血清白蛋白融合蛋白的表达及纯化 |
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引用本文: | 张琦,雷楗勇,丁月娣,陈蕴,屈琳,陈淑娴,金坚.人b干扰素与人血清白蛋白融合蛋白的表达及纯化[J].生物工程学报,2009,25(11):1746-1752. |
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作者姓名: | 张琦 雷楗勇 丁月娣 陈蕴 屈琳 陈淑娴 金坚 |
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作者单位: | 江南大学医药学院细胞与分子药理学实验室,无锡,214122 |
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基金项目: | 国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2006AA02Z153)资助~~ |
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摘 要: | 为开展人β干扰素-人血清白蛋白融合蛋白(IFNβ-HAS)的临床前研究,本研究采用免疫学方法对毕赤酵母转化子进行筛选,得到高产菌株8株。在5L发酵罐上对高产菌株进行诱导表达,产量达500mg/L。发酵液经超滤浓缩、染料亲和层析、镍离子螯合亲和层析和DEAE离子交换层析纯化后,融合蛋白纯度达到96%。Westernblotting杂交表明融合蛋白具有人血清白蛋白和人β干扰素的抗原性,细胞病变抑制法测定IFNβ-HSA比活性为1.96×107IU/mg。建立了融合蛋白的生产工艺,为IFNβ-HSA的临床前研究奠定了基础。
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关 键 词: | β干扰素 融合蛋白 毕赤酵母 |
收稿时间: | 2009/8/24 0:00:00 |
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