| BmNPV和AcNPV扩大寄主域杂交重组病毒表达载体的构建和改进 |
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| 引用本文： | 吴小锋,曹翠平,许雅香,鲁兴萌.BmNPV和AcNPV扩大寄主域杂交重组病毒表达载体的构建和改进[J].中国科学C辑,2004,34(2):156-164. |
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| 作者姓名： | 吴小锋 曹翠平 许雅香 鲁兴萌 |
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| 作者单位： | 浙江大学动物科学学院家蚕基因工程研究室,杭州,310029 |
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| 基金项目： | 国家农业部(2003-Z50)，浙江省科技厅重点国际合作项目(2002C24003) |
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| 摘 要： | 苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Autographa californica nuclear polyhedrosis virus, 简称AcNPV)和家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nuclear polyhedrosis virus, 简称BmNPV)表达系统是目前最主要的两类昆虫杆状病毒表达系统. 两者各具特点, 前者寄主昆虫个体较小, 但寄主范围广、适合较大规模的细胞悬浮培养生产体系; 而后者虽然寄主专一, 但以个体较大、易饲养的家蚕为寄主, 具有表达量高、 特别适合产业化水平开发的要求. 为了利用AcNPV和BmNPV各自的优势, 扩大昆虫杆状病毒的寄主范围, 以BmNPV为基础, 利用决定病毒寄主范围的DNA解旋酶基因及同源重组原理, 构建了介于BmNPV和AcNPV间的杂交重组病毒(hybrid baculovirus of AcNPV and BmNPV, 简称HyNPV). 这样构建的杂交重组病毒具有AcNPV和BmNPV的双重优点, 既能感染所有AcNPV的寄主, 又可以在家蚕中表达. 以人碱性成纤维细胞成长因子基因作为应用实例, 克隆构建了这样的一种重组杂交病毒, 可在Sf21, Tn-5, BmN培养细胞及家蚕个体中穿梭表达. 为了减少表达后重组蛋白的降解, 利用“基因敲除”法删除了杆状病毒本身的一种主要蛋白酶-半胱氨酸蛋白酶基因, 提高了重组蛋白的稳定性和表达效率.
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| 关 键 词： | BmNPV 寄主范围 昆虫杆状病毒表达系统 半胱氨酸蛋白酶基因 AcNPV |
| 收稿时间： | 2003-06-24 |
| 修稿时间： | 2003年6月24日 |
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