| 人FGF21原核表达载体的构建及重组蛋白表达 |
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| 引用本文： | 张礼林,唐青蓝,许庆忠,雷霆雯,李红梅.人FGF21原核表达载体的构建及重组蛋白表达[J].生物技术通报,2015(3):218-222. |
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| 作者姓名： | 张礼林 唐青蓝 许庆忠 雷霆雯 李红梅 |
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| 作者单位： | 贵阳医学院生物化学与分子生物学教研室;海南省第三人民医院检验科 |
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| 基金项目： | 贵州省科技计划项目资助课题(黔科合LG字[2011]012号) |
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| 摘 要： | 构建人FGF21(fibroblast growth factor,FGF)cDNA的原核表达载体并诱导其重组蛋白表达。提取人肝脏总RNA后,经RT-PCR扩增获得目的片段,构建其T载体进行保存。再构建重组原核表达载体pET-28a(+)-h FGF21,重组质粒转化至大肠杆菌菌株BL21(DE3)中,在IPTG诱导下得到可溶性表达,采用亲和层析法纯化表达产物后,进行Western blot鉴定。成功构建重组质粒pET-28(+)-hFGF21,对其进行可溶性表达后成功纯化出his-hFGF21,经Western blot鉴定该融合蛋白可与FGF21抗体特异性结合。成功构建pET-28(+)-hFGF21,并可溶性表达his-hFGF21蛋白。
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| 关 键 词： | 人成纤维细胞生长因子(FGF21) 克隆 原核表达 蛋白纯化 |
Preparation of Prokaryotic Expression Construct of Human FGF21 cDNA and Its Recombinant Protein Expression |
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| Zhang Lilin;Tang Qinglan;Xu Qingzhong;Lei Tingwen;Li Hongmei.Preparation of Prokaryotic Expression Construct of Human FGF21 cDNA and Its Recombinant Protein Expression[J].Biotechnology Bulletin,2015(3):218-222. |
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| Authors: | Zhang Lilin;Tang Qinglan;Xu Qingzhong;Lei Tingwen;Li Hongmei |
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| Institution: | Zhang Lilin;Tang Qinglan;Xu Qingzhong;Lei Tingwen;Li Hongmei;Department of Biochemistry and Molecular Biology,Guiyang Medical College;Department of Clinical Laboratory,the Third People’s Hospital of Hainan Province; |
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