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具有增强蛋白质表达活性序列ER3的筛选及其功能区域的初步鉴定
引用本文:崔成成,毕艳红,王应明,李攀,杨思达,黄芬,曾韦锟,井申荣.具有增强蛋白质表达活性序列ER3的筛选及其功能区域的初步鉴定[J].中国生物工程杂志,2015,35(3):18-24.
作者姓名:崔成成  毕艳红  王应明  李攀  杨思达  黄芬  曾韦锟  井申荣
作者单位:昆明理工大学医学院 昆明 650500
基金项目:国家自然科学基金(31360619,31160193);云南省应用基础研究面上项目(2010ZC055,2012FB135)资助项目
摘    要:目的:利用构建的增强子样序列筛选载体,筛选在大肠杆菌中增强外源蛋白质表达的序列,并利用删除突变体初步鉴定其功能区域。方法:以氯霉素乙酰转移酶(CAT)基因序列与人乳头瘤病毒(HPV)主要衣壳蛋白基因L1的截短序列L11连接作为报告基因,从采集的样品中筛选增强子样序列,通过蛋白质表达来检测其增强活性,并通过构建删除突变体来初步鉴定其功能区域。结果:成功筛选到一条增强子样序列,可使检测载体氯霉素抗体提高11倍,融合蛋白表达水平提高2.26倍,其功能区域主要集中在1~265bp。结论:从收集的样品中成功筛选出一个增强子序列,能提高外源基因在大肠杆菌中的表达。

关 键 词:增强子样序列  增强基因表达  删除突变体  功能区域  
收稿时间:2014-12-11

Screening of ER3 Sequences Enhanced Protein Expression Activity and Its Functional Regions Identification
CUI Cheng-cheng;BI Yan-hong;WANG Ying-ming;LI Pan;YANG Si-da;HUANG Fen;ZENG Wei-kun;JING Shen-rong.Screening of ER3 Sequences Enhanced Protein Expression Activity and Its Functional Regions Identification[J].China Biotechnology,2015,35(3):18-24.
Authors:CUI Cheng-cheng;BI Yan-hong;WANG Ying-ming;LI Pan;YANG Si-da;HUANG Fen;ZENG Wei-kun;JING Shen-rong
Institution:CUI Cheng-cheng;BI Yan-hong;WANG Ying-ming;LI Pan;YANG Si-da;HUANG Fen;ZENG Wei-kun;JING Shen-rong;Medical Faculty,Kunming University of Science and Technology;
Abstract:
Keywords:Enhancer-like sequence  Enhancer gene expression  Deletion mutants  Functional areas  
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