低密度脂蛋白的酶标和免疫酶标的定位研究

以辣根过氧化物酶标记人LDL、兔抗人LDLIgG或羊抗兔IgG抗体作为示踪剂,作用于培养的人胚肺细胞,经DAB-H_2O_2显色,超薄切片,电镜观察,结果表明: (1)细胞能与很低浓度LDL-HRP产生特异性结合,显示LDL受体的高亲和力。 (2)兔抗人LDLIgG-HRP与已结合在受体上的LDL的结合可被未标记的兔抗人LDLIgG封闭,而封闭后以羊抗兔IgG-HRP作用又显示特异性反应,这种反应只能在已有LDL结合的细胞膜上显示,IgG不能阻断这种反应。 (3)肝素或高浓度LDL对LDL-HRP与受体的结合产生竞争性抑制;事先经高脂培养,这种结合也受到抑制(反馈性抑制)。 (4)细胞对游离HRP不显示特异性高亲和力的结合。 (5)生长在不含LDL-HRP是培养液中的细胞也无这种特殊性反应。上述纳果说明,LDL-HRP是结合于质膜表面有外被区特异性的、高亲和力的LDL受体上。