纳豆激酶基因在E.coli HB101中的初步表达研究* |
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引用本文: | 罗立新, 黄志立, 杨汝德, 凌均建, 梁世中,.纳豆激酶基因在E.coli HB101中的初步表达研究*[J].微生物学通报,2002,29(3). |
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作者姓名: | 罗立新 黄志立 杨汝德 凌均建 梁世中 |
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作者单位: | 华南理工大学食品与生物工程学院 广州; |
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摘 要: | 利用PCR技术以纳豆杆菌染色体DNA为模板扩增纳豆激酶基因 ,将该基因克隆到温度诱导型表达载体pBV2 2 0上 ,转化E .coliHB1 0 1 ,获得转纳豆激酶基因重组菌。在确定了其最佳培养时间与诱导时间后 ,SDS PAGE分析结果表明基因表达产物为分泌型 ,蛋白表达量占菌体蛋白的12%左右 ,液体发酵后纳豆激酶产量可达 120U/mL菌液。对重组菌中重组质粒的稳定性进行研究 ,结果表明该质粒在宿主菌中具有良好的分离稳定性 ,而结构稳定性较差。
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关 键 词: | 纳豆激酶基因 克隆 表达 质粒稳定性 |
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