| 聚乙二醇定点修饰重组人粒细胞集落刺激因子突变体的研究 |
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| 引用本文： | 黄岩山,金荣,刘晓妮,王昌梅,戎亚雯,陈智. 聚乙二醇定点修饰重组人粒细胞集落刺激因子突变体的研究[J]. 微生物学报, 2007, 23(5) |
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| 作者姓名： | 黄岩山 金荣 刘晓妮 王昌梅 戎亚雯 陈智 |
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| 作者单位： | 浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所，杭州 310003;杭州九源基因工程有限公司，杭州 310018;杭州九源基因工程有限公司，杭州 310018;杭州九源基因工程有限公司，杭州 310018;杭州九源基因工程有限公司，杭州 310018;浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所，杭州 310003 |
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| 基金项目： | 浙江省重大科技攻关项目(No.2005C13025)。 |
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| 摘 要： | 研究了重组人粒细胞集落刺激因子突变体（rmhG-CSF）的聚乙二醇化修饰、分离纯化和活性鉴定。通过对人重组粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）第1，3，4，5，17位氨基酸进行突变，并在C末端加了一个半胱氨酸，获得了体外活性为原型rhG-CSF 150％以上的重组人粒细胞集落刺激因子突变体（rmhG-CSF）。然后用分子量为20kD的甲氧聚乙二醇马来酸酐（mPEG-Mal）修饰rmhG-CSF，反应混合物经离子交换和凝胶过滤柱纯化，得到纯化的聚乙二醇重组人粒细胞集落刺激因子突变体（PEG-rmhG-CSF）。SDS-PAGE电泳分析表明纯化后的PEG-rmhG-CSF的纯度大于95％，体外活性分析表明PEG-rmhG-CSF活性优于目前临床使用的聚乙二醇重组人粒细胞集落刺激因子（PEG-rhG-CSF，Neulasta?），药代动力学研究表明PEG-rmhG-CSF体内半衰期约为14h，比修饰前延长了7倍。
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| 关 键 词： | 聚乙二醇化修饰，重组人粒细胞集落刺激因子突变体，纯化，鉴定 |
Study of Target Pegylated Recombinant Mutant Human Granulocyte Colony Stimulating Factor |
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| HUANG Yan-Shan,JIN Rong,LIU Xiao-Ni,WANG Chang-Mei,RONG Ya-Wen and CHEN Zhi. Study of Target Pegylated Recombinant Mutant Human Granulocyte Colony Stimulating Factor[J]. Acta microbiologica Sinica, 2007, 23(5) |
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| Authors: | HUANG Yan-Shan JIN Rong LIU Xiao-Ni WANG Chang-Mei RONG Ya-Wen CHEN Zhi |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | pegylation recombinant mutant human granulocyte colony stimulating factor purification characterization |
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