| 多孔微载体无血清培养rCHO细胞生产u-PA |
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| 引用本文： | 胡显文 肖成祖 李佐虎 郭志霞 高丽华 张正光 胥照平 王菲. 多孔微载体无血清培养rCHO细胞生产u-PA[J]. 生物工程学报, 2000, 16(3) |
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| 作者姓名： | 胡显文 肖成祖 李佐虎 郭志霞 高丽华 张正光 胥照平 王菲 |
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| 作者单位： | 1.军事医学科学院生物工程研究所 北京 100071；2.中国科学院化工冶金研究所生化工程国家重点实验室 北京 100080 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 摘 要： | 在30L搅拌式反应器中无血清培养分泌尿激酶型纤溶酶原激活剂(u-PA)的DNA重组CHO细胞，定期部分更换Cytopore多孔微载体，使生长在多孔微载体中的细胞不断更新繁殖，解决大规模细胞培养中的细胞凋亡问题。在91d连接换液培养过程中，细胞密度可维持在(1.3～2.6)×107/mL，活细胞比率维持在90%以上。在7.5L搅拌罐中培养细胞，利用外部周期性压力振荡刺激并结合载体更新技术，可减轻密度效应对细胞生长和表达的影响，在一定程度上提高细胞在高密度培养条件下的表达水平。在67d连续换液培养中，细胞最高密度为2.64×107/mL，活细胞比率维持在95%以上。与稳压操作相比，利用周期变压刺激技术可提高产量10%～20%，且可降低葡萄糖厌氧代谢生成乳酸的转化率，利用4步纯化工艺，从含u-PA约135g的2100 L上清中获得约80guPA(单链比例约为90%)。
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| 关 键 词： | 动物细胞培养， 多孔微载体， 尿激酶原， 无血清培养基， 周期外部刺激 |
Production of u-PA with rCHO Cell Culture on Porous Microcarriers in Serum-free Growth Medium |
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| HU Xian-wen,XIAO Cheng-Zu,LI Zuo-hu,GUO Zhi-Xia,GAO Li-Hua,ZHANG Zheng-guang,XU Zhao-Ping,WANG Fei. Production of u-PA with rCHO Cell Culture on Porous Microcarriers in Serum-free Growth Medium[J]. Chinese journal of biotechnology, 2000, 16(3) |
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| Authors: | HU Xian-wen XIAO Cheng-Zu LI Zuo-hu GUO Zhi-Xia GAO Li-Hua ZHANG Zheng-guang XU Zhao-Ping WANG Fei |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Animal cell culture porous microcarrier prourokinase serum-free medium periodic artificial stimulus |
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