| H5N1亚型禽流感病毒拯救体系的建立 |
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| 引用本文： | 龙进学 吴艳涛 张小荣 王曲直 刘秀梵. H5N1亚型禽流感病毒拯救体系的建立[J]. 微生物学报, 2006, 46(1): 55-59 |
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| 作者姓名： | 龙进学 吴艳涛 张小荣 王曲直 刘秀梵 |
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| 作者单位： | 扬州大学,农业部畜禽传染病学重点开放实验室,扬州,225009 |
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| 基金项目： | 国家科技攻关项目(2004BA519A19)，江苏省属高校重大基础研究项目(05KJA23016)~~ |
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| 摘 要： | 选择鸡胚高产的鸭源H5N1亚型禽流感病毒A/Duck/Shandong/093/2004株作为骨架病毒,在完成了全基因组序列测定基础上,设计合成的11对引物对病毒的8个基因分11段进行扩增。通过与转录载体PHW2000连接,构建A/SD/04的8个基因的拯救载体,经测序获得序列准确的拯救质粒:2412、42、243、244、245、246、247和248。A/SD/04的8质粒与PR8(H1N1)进行不同组合的拯救,获得8个均含A/SD/04 HA基因的H5重组流感病毒。鸡胚尿囊液中重组病毒的血凝效价在28~210,EID50在10-8.5~10-9之间,MDT在34~46h之间,均与野生A/SD/04(wt A/SD/04)相似。重组病毒对6周龄的SPF鸡的静脉接种指数(IVPI)与wt A/SD/04却有明显的差异,说明不同组合的内部基因影响病毒对鸡的致病力,但不影响病毒的鸡胚致死能力、对鸡胚的感染能力和病毒在鸡胚中的繁殖能力。构建的A/SD/04的8个质粒拯救系统,为H5N1的基因功能研究和新型疫苗开发奠定基础。
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| 关 键 词： | H5N1亚型禽流感病毒 8质粒拯救系统 病毒拯救 重组病毒 |
| 文章编号： | 0001-6209（2006）01-0055-05 |
| 收稿时间： | 2005-04-13 |
| 修稿时间： | 2005-04-132005-09-16 |
Establishment of reverse genetics system for H5N1 subtype AI |
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| LONG Jin-xue,WU Yan-tao,ZHANG Xiao-rong,WANG Qu-zhi,LIU Xiu-fan. Establishment of reverse genetics system for H5N1 subtype AI[J]. Acta microbiologica Sinica, 2006, 46(1): 55-59 |
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| Authors: | LONG Jin-xue WU Yan-tao ZHANG Xiao-rong WANG Qu-zhi LIU Xiu-fan |
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| Affiliation: | Key Laboratory of Animal lnfectioas Diseases of Ministry of Agriculture, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | H5N1 subtype influenza A virus Eight-plasmid system Virus rescue Reassorted virus |
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