| 转基因甘蔗植株Southern杂交体系的优化北大核心CSCD |
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| 引用本文： | 崔学强,张树珍,沈林波,冯翠莲.转基因甘蔗植株Southern杂交体系的优化北大核心CSCD[J].生物技术通报,2015(12):105-109. |
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| 作者姓名： | 崔学强 张树珍 沈林波 冯翠莲 |
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| 作者单位： | 1.海南大学农学院570228;2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所甘蔗研究中心农业部热带作物生物技术重点开放实验室571101; |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31101197)；现代农业产业技术体系建设专项基金(CARS-20-2-5) |
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| 摘 要： | 对甘蔗Southern杂交体系的优化,旨为转基因甘蔗Southern杂交鉴定分析提供参考。以转基因甘蔗为材料,就探针不同标记方法的比较、甘蔗基因组DNA的提取、基因组DNA酶切量、酶切时间及杂交过程等方面,对地高辛标记的Southern杂交技术进行了优化研究。结果表明,改良的CTAB法提取的甘蔗DNA能满足后期实验的要求;PCR法标记探针的效率较随机引物法标记探针的效率高,更适合用于Southern杂交;40μg的DNA在400μL酶切体系中,酶切10 h可获得良好的酶切效果;杂交温度40℃,杂交18 h,可获得清晰的杂交条带。
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| 关 键 词： | 甘蔗 Southern杂交 地高辛 PCR法标记探针 酶切 |
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