| 含RGD序列的山蛭素突变体的克隆、表达及性质研究 |
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| 引用本文： | 赵菁菁,杨江峰,茹炳根. 含RGD序列的山蛭素突变体的克隆、表达及性质研究[J]. 生物化学与生物物理进展, 2004, 31(12): 1125-1133 |
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| 作者姓名： | 赵菁菁 杨江峰 茹炳根 |
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| 作者单位： | 北京大学生命科学学院,蛋白质工程国家重点实验室,北京,100871 |
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| 摘 要： | 根据LAP（leech antihemostatic protein）理论，在分析山蛭素和decorsin结构特征的基础上，利用重组PCR方法，删除了山蛭素氨基酸序列的33位至35位，同时分别插入了RGDS和来源于decorsin的一段PRGDADP序列构建成为2种含RGD序列的山蛭素突变体，分别命名为HRGD1和HRGD2.这2种突变体在毕赤酵母菌株GS115中得到成功表达.经过超滤、阳离子交换层析和凝胶过滤层析等纯化步骤之后，得到纯度高于95%的目的蛋白.通过以chromozym TH为底物的凝血酶酰胺水解实验和血小板聚集抑制实验证实了其体外生物学活性，HRGD1和HRGD2抑制凝血酶的动力学常数达到10-13 mol/L水平，抑制血小板的IC50在10-6 mol/L水平上.
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| 关 键 词： | 山蛭素，RGD 凝血酶抑制剂，抗凝剂 |
| 收稿时间： | 2004-07-28 |
| 修稿时间： | 2004-08-30 |
Cloning, Expression and Identification of Bifunctional Thrombin Inhibitor HRGD2 |
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| ZHAO Jing-Jing,YANG Jiang-Feng and RU Bing-Gen. Cloning, Expression and Identification of Bifunctional Thrombin Inhibitor HRGD2[J]. Progress In Biochemistry and Biophysics, 2004, 31(12): 1125-1133 |
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| Authors: | ZHAO Jing-Jing YANG Jiang-Feng RU Bing-Gen |
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| Affiliation: | National Laboratory of Protein Engineering, College of Lifescience, Peking University, Beijing 100871, China;National Laboratory of Protein Engineering, College of Lifescience, Peking University, Beijing 100871, China;National Laboratory of Protein Engineering, College of Lifescience, Peking University, Beijing 100871, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | haemadin RGD thrombin inhibitor anticoagulant |
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