| 家蚕精氨酸激酶原核表达纯化、结构与活性分析 |
| |
| 引用本文： | 何华伟,王叶菁,赵敏健,位曙光,赵朋,蒋文超,刘莉娜,赵萍. 家蚕精氨酸激酶原核表达纯化、结构与活性分析[J]. 生物工程学报, 2017, 33(7): 1109-1123 |
| |
| 作者姓名： | 何华伟 王叶菁 赵敏健 位曙光 赵朋 蒋文超 刘莉娜 赵萍 |
| |
| 作者单位： | 1 西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室，重庆 400715,2 西南大学生物技术学院，重庆 400715,2 西南大学生物技术学院，重庆 400715,1 西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室，重庆 400715,1 西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室，重庆 400715,1 西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室，重庆 400715,1 西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室，重庆 400715,1 西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室，重庆 400715 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目 (Nos. 31402139, 31572465)，国家自然科学基金重点项目 (No. 31530071)，重庆市基础科学与前沿技术研究专项 (Nos. cstc2015jcyjA00040, cstc2015jcyjBX0035)，中央高校基本科研业务费 (No. XDJK2013A019)，西南大学博士基金 (No. SWU112111) 资助。 |
| |
| 摘 要： | 精氨酸激酶(Arginine kinase,AK)是无脊椎动物体内能量代谢的关键酶,在生长发育、营养利用、免疫抗性、胁迫应答等生命活动过程中发挥着重要的调控作用。家蚕精氨酸激酶BmAK与能量平衡、抗NPV病毒过程相关,但目前关于其分子结构和酶学性质的研究不多。克隆了BmAK基因ORF序列,分析了其染色体定位、基因组结构、mRNA结构、二级结构和三级结构。进化分析表明AK在进化过程中高度保守。原核表达获得了可溶性的BmAK重组蛋白,通过Ni-NTA亲和层析纯化了BmAK。圆二色光谱分析显示BmAK包含α螺旋结构,其α螺旋结构在pH 5–10范围内相对稳定。酶活分析表明BmAK的最适温度为30℃,最适pH为7.5。25℃时BmAK的催化活性最大,在15–30℃范围内,BmAK的结构相对稳定,活性差别不大。BmAK的结构在pH 7.0左右相对稳定。这些研究为揭示BmAK的结构和功能提供了基础,有助于开发以AK为分子靶标的绿色安全环保的新型杀虫剂。
|
| 关 键 词： | 家蚕，精氨酸激酶，表达纯化，结构，活性 |
| 收稿时间： | 2016-01-05 |
Prokaryotic expression, purification and characterization of arginine kinase of Bombyx mori |
| |
| Affiliation: | 1 State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Southwest University, Chongqing 400715, China,2 College of Biotechnology, Southwest University, Chongqing 400715, China,2 College of Biotechnology, Southwest University, Chongqing 400715, China,1 State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Southwest University, Chongqing 400715, China,1 State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Southwest University, Chongqing 400715, China,1 State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Southwest University, Chongqing 400715, China,1 State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Southwest University, Chongqing 400715, China and 1 State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Southwest University, Chongqing 400715, China |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Bombyx mori arginine kinase expression and purification structure activity |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《生物工程学报》浏览原始摘要信息 |
|
点击此处可从《生物工程学报》下载全文 |
|
