| 含MPN结构域蛋白（MPND）通过上调乙型肝炎病毒X蛋白水平影响其功能 |
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| 作者姓名： | 张翼 吴琼 施佳健 张璐 林旭 陈婉南 |
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| 作者单位： | 1. 福建医科大学消化道恶性肿瘤教育部重点实验室;2. 福建省肿瘤微生物学重点实验室;3. 福建医科大学基础医学院病原生物学系 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（项目号：81672031）,题目：BRG1相关因子155对乙型肝炎病毒X蛋白翻译后水平的调控及意义；;福建省自然科学基金项目（项目号：2019J01299）,题目：乙型肝炎病毒剪接特异性蛋白HBDSP通过诱导上皮间质转化促进肝癌细胞侵袭转移机制研究； |
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| 摘 要： | 乙型肝炎病毒X蛋白（Hepatitis B virus X protein,HBx）在生成后即被快速降解，但目前影响HBx稳定性的机制仍未完全阐明。课题组前期通过酵母双杂交筛选与HBx具有相互作用的去泛素化酶（Deubiqutinases,DUBs），含MPN结构域蛋白（MPN domain containing protein,MPND）为筛选获得的蛋白之一。本研究首先采用免疫共沉淀和激光共聚焦实验验证HBx与MPND的相互作用，并通过酵母双杂交实验进一步分析两者相互作用的区域。Western blot检测过表达MPND的肝癌细胞中HBx蛋白水平的变化。以蛋白合成抑制剂环己酮亚胺（Cycloheximide,CHX）或蛋白酶体抑制剂MG132处理细胞，检测MPND对HBx蛋白半衰期及降解途径的影响。通过泛素化实验分析MPND对HBx泛素化水平的影响。采用双荧光素酶报告基因检测实验和克隆形成实验检测MPND对HBx生物学功能的影响。结果显示，MPND与HBx在肝癌细胞内存在相互作用，且HBx的26～50和81～120位氨基酸与MPND的272～362位氨基酸介导HBx与MPND的结合；...
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| 关 键 词： | 乙型肝炎病毒X蛋白 去泛素化酶 蛋白酶体 蛋白降解 |
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