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DNA分析与扩增
摘    要:930026大于1 0kb的DNA片段的离体扩增英";/Kainz,P.…,Ana|.Bioehem.-1992,202(1).一46~49C译自DBA,1992,11(13),92~07224] 从九噬菌体模板合成10.9kb DNA片段,以扩大PCR范围。采用已发表的引物序列和条件时,应用AmpIiTaq和1人J,l三的Taq DNA聚合酶进行扩增的结果不他,ifli应用TLlb DNA聚合酶根本不能扩增这一片段。因此,采用Tub酶和二步PCR扩增方法(65℃进行退火和延伸,然后在9CC变性1.5分钟),获得了可靠的结果。酶浓度降到0.4U/50芦l,延伸时间减到4~12分钟(最优为8分钟)时,目标片段可被特异地扩增。若延长到20分钟以上,…

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