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| 含有融合标记基因和LoxP/FRT位点的植物表达载体构建及应用 | |
| 引用本文： | 朱友银,田晓娥,赵德刚.含有融合标记基因和LoxP/FRT位点的植物表达载体构建及应用[J].基因组学与应用生物学,2011,30(4). |
| 作者姓名： | 朱友银 田晓娥 赵德刚 |
| 作者单位： | 1. 贵州大学贵州省农业生物工程重点实验室,贵阳,550025;贵州大学绿色农药与农业生物工程国家重点实验室培育基地,贵阳,550025 2. 贵州大学贵州省农业生物工程重点实验室,贵阳,550025;贵州大学生命科学学院,贵阳,550025 3. 贵州大学贵州省农业生物工程重点实验室,贵阳,550025;贵州大学生命科学学院,贵阳,550025;贵州大学绿色农药与农业生物工程国家重点实验室培育基地,贵阳,550025 |
| 基金项目： | 贵州省科技厅转基因专项，国家转基因生物新品种培育重大专项，国家科技部国际科技合作项目 |
| 摘 要： | 本研究利用化学合成法合成了包含pCAMBIA0390左右边界T-DNA和LoxP/FRT (LF)位点的DNA片段Ⅰ,利用SacⅡ和SphⅠ酶切位点,去除了pCAMBIA0390左右边界T-DNA和多克隆位点之间的序列,然后连接DNA片段Ⅰ和载体片段,构建了植物表达载体pGM323-LF-enTP.随后,再合成含有适合在单子叶植物中表达的由玉米Ubi-1启动子驱动的融合标记基因(Bar::gus)和水稻actin-1启动子驱动的Bt抗虫蛋白基因(Cry1Ab)表达元件的DNA片段Ⅳ,在pGM323-LF-enTP的基础上,利用SalⅠ和PstⅠ位点构建了同时含有LF位点、Bar::gus以及Cry1Ab基因表达元件的表达载体pGM626-LF-ABt.利用含有pGM626-LF-ABt的农杆菌遗传转化烟草和玉米,以草丁膦作为抗性筛选剂,非转化细胞得到了有效抑制,快速获得了转基因植株,利用GUS组织化学检测和RT-PCR分析了转基因植株中标记基因的表达,结果表明pGM626-LF-ABt可以用于农杆菌介导的单、双子叶植物遗传转化.本研究为培育安全抗虫转基因植物奠定了基础. |
| 关 键 词： | 融合筛选标记 Bar::gus 融合重组酶位点 LoxP/FRT 植物遗传转化 |
Construction and Application of the Vector Containing the Bar::gus Fusion Gene and LoxP/FRT Recognition Site |
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| Zhu Youyin,Tian Xiao'e,Zhao Degang.Construction and Application of the Vector Containing the Bar::gus Fusion Gene and LoxP/FRT Recognition Site[J].Genomics and Applied Biology,2011,30(4). | |
| Authors: | Zhu Youyin Tian Xiao'e Zhao Degang |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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