| 不同精子处理对应用ICSI-Tr技术生产转基因水牛胚胎效率的影响 |
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| 引用本文： | 刘庆友,王丹,张会娜,陈自洪,孟凡丽,陆凤花,石德顺.不同精子处理对应用ICSI-Tr技术生产转基因水牛胚胎效率的影响[J].基因组学与应用生物学,2011,30(4). |
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| 作者姓名： | 刘庆友 王丹 张会娜 陈自洪 孟凡丽 陆凤花 石德顺 |
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| 作者单位： | 广西大学亚热带生物资源保护利用国家重点实验室,南宁,530004 |
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| 基金项目： | 国家转基因重大专项，国家自然基金，广西自然基金，南宁市科技攻关 |
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| 摘 要： | 本文主要探讨了不同精子处理对应用显微授精介导(intracytoplasmic sperm injection-mediated transgenesis,ICSI-Tr)生产转基因水牛胚胎效率的影响.本试验以p18T-BCN5.2-IFN-1.1pA-EGFP为载体,比较了精子的不同处理方式(NaOH和冻融)、NaOH处理精子不同时间(5 min,10 min,20 min,30 min和60 min)以及不同外源DNA浓度(5 ng/μL,10 ng/μL,25 ng/μL和50 ng/μL)对ICSI-Tr转基因效率的影响.结果显示:NaOH处理组的囊胚EGFP表达率(46.1%),与冻融精子处理组(47.1%)差异不显著,但发育率显著高于冻融处理精子组(28.3% vs 16.7%,P<0.05).处理60 min组和30 min组的分裂率分别为78.9%和77.5%,显著高于20 min、10 min和5 min组的64.0%、60.0%和64.0% (P<0.05),其中30 min处理组的囊胚EGFP表达率高达44.4%,显著高于其它处理组(P<0.05).25 ng/μL组和50 ng/μL组的早期胚胎EGFP表达效率差异不显著(41.3% vs 42.5%),但显著高于5 ng/μL组和10 ng/μL组(22.5%和35.5%),25 ng/μL组的囊胚EGFP表达效率显著高于其它组(P<0.05).本研究优化了应用ICSI-Tr生产转基因水牛胚胎技术体系,为获得ICSI-Tr转基因水牛奠定了良好的工作基础.
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| 关 键 词： | 水牛 ICSI-Tr 转基因胚胎 |
Effects of Sperm Treatment on Efficiency of Production Transgenic Buffalo Embryo Using ICSI-Tr Technique |
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| Liu Qingyou,Wang Dan,Zhang Huina,Chen Zihong,Meng Fanli,Lu Fenghua,Shi Deshun.Effects of Sperm Treatment on Efficiency of Production Transgenic Buffalo Embryo Using ICSI-Tr Technique[J].Genomics and Applied Biology,2011,30(4). |
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| Authors: | Liu Qingyou Wang Dan Zhang Huina Chen Zihong Meng Fanli Lu Fenghua Shi Deshun |
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