Asia1型口蹄疫病毒分离株结构蛋白基因的克隆与表达 |
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引用本文: | 独军政,常惠芸,丛国正,林彤,邵军军,付生芳,刘在新,谢庆阁.Asia1型口蹄疫病毒分离株结构蛋白基因的克隆与表达[J].中国病毒学,2005,20(1):65-69. |
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作者姓名: | 独军政 常惠芸 丛国正 林彤 邵军军 付生芳 刘在新 谢庆阁 |
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作者单位: | 中国农业科学院兰州兽医研究所国家口蹄疫参考实验室,甘肃,兰州,730046 |
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基金项目: | 国家重点基础研究发展规划"973"项目资助(G1999011904) |
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摘 要: | 口蹄疫病毒结构蛋白氨基酸的变化是病毒抗原性变异的分子基础,大部分抗原表位位于主要的免疫原蛋白VP1上,部分非线性抗原表位位于VP2和VP3上.本研究首次成功测定了Asia1型口蹄疫病毒(YNBS/58)四种结构蛋白基因(p1区)的核苷酸序列,全长2199个碱基,编码733个氨基酸,该基因与Ind63/72、Pka3/54、Israel、China/99、C1/Germany、A22、ZIM7/83/2毒株的p1基因核苷酸序列同源性分别为88.4%、86.0%、89.3%、68.6%、67.6%、66.8%、50.3%,推导的氨基酸序列同源性分别为94.1%、93.2%、95.1%、79.9%、77.0%、76.5%、58.1%;将YNBS/58株与Ind63/72、Pka3/54、Israel株的vp1、vp2、vp3、vp4基因和编码蛋白分别进行同源性比较,发现VP1的序列变异最大,VP2、VP3、VP4次之,且VP1的氨基酸变异主要集中在42-50位和137-156位.实现了YNBS/58株结构蛋白基因在大肠杆菌中的高效表达,其表达的融合蛋白以包涵体形式存在,分子量约为88kDa,占菌体总蛋白的16%左右,并利用镍柱对目的蛋白进行了纯化,纯度达90%以上,本实验为进一步研究A-sia1型口蹄疫病毒的分子流行病学、p1基因及其编码蛋白的生物学功能奠定了基础.
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关 键 词: | Asia1型口蹄疫病毒 结构蛋白基因 分子特征 表达 |
文章编号: | 1003-5125(2005)01-0065-05 |
修稿时间: | 2004年8月23日 |
Molecular Characteristics and Expression of Structural Protein Gene of Foot-and-Mouth Disease Virus Type Asia1 |
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