| 重组SM22αC端肽段促进细胞骨架重构 |
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| 作者姓名： | Shi JH Zheng B Meng F Wen JK Han M |
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| 作者单位： | 河北医科大学基础医学研究所,河北省医学生物技术重点实验室,河北,石家庄,050017 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;河北省自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的:探讨SM22αC端功能域肽段与细胞骨架F-actin聚合的关系,明确SM22α在血管平滑肌细胞(VSMC)骨架重构中的作用。方法:构建GST-SM22αC端功能域融合蛋白原核表达质粒pGEX3X-SM22α,诱导E coli高效表达可溶性GST-SM22α融合蛋白,制备抗SM22α抗体,VSMC蛋白分步提取及Western blot检测F-actin/G-actin中SM22α的含量变化,GST-pull down分析和免疫共沉淀检测SM22α与actin的相互作用,细胞免疫双荧光染色观察SM22α和actin在VSMC中的定位关系。结果:所构建的pGEX3X-SM22α原核表达质粒,在0.5mmol/LIPTG,30℃诱导6h条件下,表达可溶性GST-SM22α融合蛋白的水平最高,用纯化的融合蛋白免疫新西兰白兔获得的抗血清效价为1∶16。免疫双荧光染色和蛋白分步提取分析结果表明,在VSMC再分析过程中,SM22α与F-actin共定位,GSTpull down分析和免疫共沉淀结果均显示,SM22α通过C端功能域与F-actin相互作用而参与细胞骨架的重构;但是,SM22α与G-actin的结合能力较弱。结论:本研究重组得到的SM22αC端功能域具有与F-actin结合的活性,SM22α通过该区域与actin相互作用而参与细胞骨架重构。
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| 关 键 词： | SM22α 可溶性表达 细胞骨架 血管平滑肌 |
| 文章编号： | 1000-6834（2007）03-0370-05 |
| 修稿时间： | 2005-11-18 |
Recombinant C-terminal fragment of SM22 induces cytoskeleton reorganization |
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| Shi JH,Zheng B,Meng F,Wen JK,Han M.Recombinant C-terminal fragment of SM22 induces cytoskeleton reorganization[J].Chinese Journal of Applied Physiology,2007,23(3):370-374. |
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| Authors: | Shi Jian-Hong Zheng Bin Meng Fang Wen Jin-Kun Han Mei |
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| Institution: | Hebei Laboratory of Medical Bioteehnology, Institute of Basic Medicine, Hebei Medical University, Shijiazhuang 050017, China |
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| Abstract: | |
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