| 烟草SKP1基因的原核表达 |
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| 引用本文： | 张付云,赵小明,白雪芳,杜昱光.烟草SKP1基因的原核表达[J].西北植物学报,2009,29(8). |
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| 作者姓名： | 张付云 赵小明 白雪芳 杜昱光 |
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| 作者单位： | 1. 中国科学院,大连化学物理研究所,辽宁省碳水化合物研究重点实验室,辽宁大连,116023;大连水产学院,辽宁大连,116023
2. 中国科学院,大连化学物理研究所,辽宁省碳水化合物研究重点实验室,辽宁大连,116023 |
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| 基金项目： | 国家"863"计划项目，中国科学院知识创新工程重要方向项目，辽宁省自然科学基金项目 |
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| 摘 要： | 为获取大量高纯度的枯斑三生烟SKP1蛋白以便研究其功能和性质,以pMD18-SKP1质粒为模板, PCR扩增枯斑三生烟的SKP1基因的cDNA编码区,经酶切后构建表达载体pET23b-SKP1,转入大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,并考察不同的IPTG诱导终浓度、表达时间和表达温度对目的蛋白His-SKP1表达量的影响.SDS-PAGE分析结果表明:最佳表达条件为不加诱导剂的情况下,37℃表达8 h.
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| 关 键 词： | 烟草 SKP1基因 原核表达 |
Prokaryotic Expression for SKP1 Gene of Tobacco |
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| ZHANG Fu-yun,ZHAO Xiao-ming,BAI Xue-fang,DU Yu-guang.Prokaryotic Expression for SKP1 Gene of Tobacco[J].Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica,2009,29(8). |
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| Authors: | ZHANG Fu-yun ZHAO Xiao-ming BAI Xue-fang DU Yu-guang |
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| Institution: | ZHANG Fu-yun1,2,ZHAO Xiao-ming1,BAI Xue-fang1,DU Yu-guang1(1 Dalian Institute of Chemical Physics,Chinese Academy of Sciences,Liaoning Provincial Key Laboratory of Carbohydrate,Dalian,Liaoning 116023,China,2 Dalian Fisheries University,China) |
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| Abstract: | To obtain the SKP1 protein of tobacco with high purity in a large scale,the cDNA of SKP1 gene was amplified by PCR using pMD18-SKP1 as template,and was inserted into expression vector pET23b after being digested by restriction endonuclease.The recombinant plasmid pET23b-SKP1 was transformed into E.coli BL21(DE3) for expression.In order to improve expression level of His-SKP1,the effects of various conditions were studied,including IPTG concentration,expression time and temperature.The results of SDS-PAGE an... |
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| Keywords: | tobacco gene of SKP1 prokaryotic expression |
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