| 融合蛋白1hFVII-LDM的制备及其对乳腺癌细胞的抑制作用 |
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| 引用本文： | 胡莲,廖东升,吴传芳. 融合蛋白1hFVII-LDM的制备及其对乳腺癌细胞的抑制作用[J]. 细胞生物学杂志, 2011, 0(9) |
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| 作者姓名： | 胡莲 廖东升 吴传芳 |
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| 作者单位： | 四川大学生命科学院功能基因组实验室; |
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| 基金项目： | 《重大新药创制》国家科技重大专项课题基金(No 2009ZX09103)资助项目~~ |
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| 摘 要： | 该文主要研究了强化融合蛋白lhFⅦ-LDM对乳腺癌MDA-MB-231细胞的抑制作用。通过PCR和重叠PCR的方法构建了pET19b-lhFⅦ-LDP表达载体,重组质粒转化BL21,经IPTG诱导后表达并用Co~(2+)亲和层析纯化lhFⅦ-LDP融合蛋白,Western blot检测融合蛋白的正确性,再通过分子重组的方法将lhFⅦ-LDP与力达霉素(LDM)的活性发色团(AE)组装成为强化融合蛋白lhFⅦ-LDM。通过免疫共沉淀实验鉴定lhFⅦ-LDP与组织因子(TF)的特异性结合作用,利用平板克隆形成实验观察lhFⅦ-LDM对细胞增殖的影响,采用Hoechst33342染色检测lhFⅦ-LDM诱导MDA-MB-231细胞凋亡情况,建立了人乳腺癌裸鼠肿瘤模型,研究lhFⅦ-LDM对MDA-MB-231肿瘤生长的抑制作用。结果显示,lhFⅦ-LDM强化融合蛋白在体外能很好的诱导MDA-MB-231细胞凋亡,动物实验结果表明,强化融合蛋白对MDA-MB-231肿瘤的生长具有显著的抑制作用。
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| 关 键 词： | 凝血因子Ⅶ LDM 肿瘤抑制 MDA-MB-231细胞 表达纯化 |
Preparation of Fusion Protein 1hFVII-LDM and Its Inhibitory Effect on Breast Tumor |
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| Hu Lian,Liao Dongsheng,Wu Chuanfang. Preparation of Fusion Protein 1hFVII-LDM and Its Inhibitory Effect on Breast Tumor[J]. Chinese Journal of Cell Biology, 2011, 0(9) |
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| Authors: | Hu Lian Liao Dongsheng Wu Chuanfang |
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| Affiliation: | Hu Lian,Liao Dongsheng,Wu Chuanfang~* (Department of Functional Genome,College of Life Science,Sichuan University,Chengdu 610064,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | factor VII LDM tumor suppression MDA-MB-231 cell expression and purification |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
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