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靶向山羊痘病毒DNA聚合酶基因shRNA质粒表达载体的构建及筛选
引用本文:王安涛,陈创夫,乔军,张辉,张娜,胡圣伟.靶向山羊痘病毒DNA聚合酶基因shRNA质粒表达载体的构建及筛选[J].细胞生物学杂志,2011(5).
作者姓名:王安涛  陈创夫  乔军  张辉  张娜  胡圣伟
作者单位:石河子大学生命科学学院;新疆民族与地方高发病教育部重点实验室;石河子大学动物科技学院;
基金项目:转基因生物新品种培育国家重大专项(No.2009ZX08005-003B)资助项目~~
摘    要:本研究针对山羊痘病毒基因组高度保守的DNA聚合酶区段,选取了5个干扰靶位点。根据RNAi技术原理,构建了包括对照在内的6个shRNA重组表达质粒,转染细胞后接种病毒,通过细胞毒液的TCID_(50)测定和用实时荧光定量PCR检测siRNA重组质粒对羊痘病毒DNA聚合酶基因表达的抑制作用。结果显示,重组表达质粒组的抑制率在63%以上,其中以pSI-W2最为明显,抑制率为93.8%。该研究应用RNAi技术在细胞水平筛选出了能够高效抑制山羊痘病毒增殖的干扰片段,为抗山羊痘病毒转基因羊的研究奠定了基础。

关 键 词:RNAi  山羊痘病毒  BHK-21  抑制  

Construction and Screening of Plasmid Expression Vectors Encoding the Short Hairpin RNA Targeting DNA Polymerase of Goatpox Virus
An-Tao Wang,Chuang-Fu Chen,Jun Qiao,Hui Zhang,Na Zhang,Sheng-Wei Hu.Construction and Screening of Plasmid Expression Vectors Encoding the Short Hairpin RNA Targeting DNA Polymerase of Goatpox Virus[J].Chinese Journal of Cell Biology,2011(5).
Authors:An-Tao Wang  Chuang-Fu Chen  Jun Qiao  Hui Zhang  Na Zhang  Sheng-Wei Hu
Institution:An-Tao Wang~(1,3),Chuang-Fu Chen~(1*),Jun Qiao~(1*),Hui Zhang~2,Na Zhang~1,Sheng-Wei Hu~2 (1 College of Life Science,Shihezi University,Shihezi 832003,China,2 College of Animal Science & Technology,3 Laboratory of Xinjiang Endemic and Ethnic Disease,China)
Abstract:
Keywords:RNAi  Goatpox virus  BHK-21  inhibition  
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