| 人干扰素α 2b-胸腺肽α 1融合基因在家蚕细胞中的表达和活性研究 |
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| 引用本文： | 郭冬生,朱成钢,张耀洲,吴祥甫.人干扰素α 2b-胸腺肽α 1融合基因在家蚕细胞中的表达和活性研究[J].生物化学与生物物理进展,2003,30(5):803-807. |
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| 作者姓名： | 郭冬生 朱成钢 张耀洲 吴祥甫 |
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| 作者单位： | 1. 浙江大学生命科学院生物化学研究所,杭州,310029
2. 中国科学院生物化学和细胞生物学研究所,上海,200031 |
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| 摘 要： | 根据细胞因子协同作用的特点，采用重组DNA技术构建了人干扰素(IFN)α2b-胸腺肽(THY)α1融合基因，克隆到pBacPAK8上，获得重组转移载体pBacPAK-IFN-THY.与线形化Bm-BacPAK6病毒基因组DNA共转染家蚕细胞，经过体内重组，筛选到重组病毒Bm-BacPAK-IFN-THY.将Bm-BacPAK-IFN-THY感染家蚕细胞进行表达.DNA印迹证明IFN-THY已插入Bm-BacPAK6中（4 kb左右的杂交带）；SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、蛋白质印迹证明IFN-THY在家蚕细胞中得到了表达（分子质量为23 ku左右）,且具有IFN蛋白的免疫原性；微量细胞病变抑制法和玫瑰花结法显示96 h的表达产物IFN活性为3.72×104 U/ml，120 h表达产物IFN活性为3.10×105 U/ml，48～72 h表达产物IFN活性较低；48～120 h表达产物的玫瑰花结形成率均在10％以上.结果表明融合基因在家蚕细胞中得到了高效表达，表达的融合蛋白具有IFN-α2b和THY-α1的双重生物活性.
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| 关 键 词： | 人IFN-α 2b-THY-α 1融合基因，家蚕核型多角体病毒，家蚕细胞，基因表达 |
| 收稿时间： | 2003/3/14 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2003年3月14日 |
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