TGF-β2在低氧条件下诱导骨髓基质干细胞向软骨细胞分化的研究 |
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作者姓名: | 亓云龙 张睿 李红喜 李华哲 赵承斌 |
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作者单位: | 哈尔滨医科大学附属第四医院骨科 |
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基金项目: | 黑龙江省教育厅项目(11531147) |
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摘 要: | 目的:探讨转化生长因子β2(TGF-β2)在低氧条件下诱导骨髓基质干细胞(BMSCs)向软骨细胞分化的作用。方法:无菌条件下分离Wistar 大鼠股骨骨髓,采用全贴壁培养法纯化BMSCs。传6 代后,将细胞随机分为3 组,A组加入25 ng/mL TGF-β2在1%氧浓度条件下培养;B 组加入25 ng/mL TGF-β2在21%氧浓度条件下培养;C 组仅加入含10%胎牛血清的DMEM-α培养液在1%氧浓度条件下培养。3 周后,通过甲苯胺蓝染色检测细胞糖胺多糖,聚合酶链反应检测Ⅱ型胶原和蛋白聚糖(Aggrecan)的表达水平。结果:骨髓细胞经换液后贴壁聚集生长,形态均一,连续传代后形态无明显改变。分组培养第1 周,A、C 组生长速度低于B 组;第2 周各组均出现不规则形态细胞,A、C 组细胞形态小于B 组;第3 周各组均可见透明样基质,以A组最明显。3 周后行甲苯胺蓝染色,A 组细胞内外均可见丰富的蓝染颗粒,B、C 组染色较A 组略浅。A 组Ⅱ型胶原的表达相对量(1.246± 0.287) 高于B 组(0.973± 0.365)、C组(0.802± 0.196),差异有统计学意义(P<0.05);B、C 组比较无明显差异(P>0.05)。A 组Aggrecan 的表达相对量(0.833± 0.375)高于B组(0.724± 0.173)、C 组(0.602± 0.091),差异有统计学意义(P<0.05);B、C 组比较无明显差异(P>0.05)。结论:TGF-β2联合低氧环境可明显促进骨髓基质干细胞分化为软骨细胞。
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关 键 词: | 转化生长因子β2;低氧;骨髓基质干细胞;软骨细胞;软骨缺损 |
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