| STAT3小干扰RNA的构建及对缺氧复氧人肾小管上皮细胞凋亡的影响 |
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| 引用本文： | 斯妍娜韩流程浩吕云落蔡朦朦谢欣怡鲍红光. STAT3小干扰RNA的构建及对缺氧复氧人肾小管上皮细胞凋亡的影响[J]. 现代生物医学进展, 2014, 14(15): 2858-2862 |
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| 作者姓名： | 斯妍娜韩流程浩吕云落蔡朦朦谢欣怡鲍红光 |
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| 作者单位： | 南京医科大学附属南京医院（南京市第一医院）麻醉科,江苏南京210006 |
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| 基金项目： | 南京市医学重点科技发展项目（201108028）;南京市医学科技发展项目（YKK12085） |
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| 摘 要： | 目的:构建信号转导与转录因子3(STAT3)小干扰RNA(siRNA)表达载体,并观察其对缺氧复氧后人肾小管上皮细胞(HKC)凋亡的影响。方法:设计3对人STAT3 siRNA靶序列,用DNA重组技术克隆至质粒pRNAT-U6.1/neo中,构建重组质粒pRNAT-U6.1-STAT3 siRNA,检测并筛选出最佳抑制效率的siRNA质粒载体。重组质粒转染至缺氧复氧后HKC细胞,Western blotting和Real Time-PCR测定STAT3蛋白和mRNA表达量,流式细胞仪测定细胞凋亡,间接荧光法测定Bcl-2和Bax表达的变化。结果:靶向STAT3基因表达的质粒载体构建成功,并筛选出抑制效率最佳的重组质粒。缺氧复氧后HKC细胞STAT3表达、凋亡率和Bax/Bcl-2比值增加;缺氧复氧后HKC细胞转染重组质粒后STAT3表达、凋亡率和Bax/Bcl-2比值明显降低。结论:成功构建并筛选最佳抑制效率的靶向STAT3的重组质粒载体。该载体可有效抑制缺氧复氧后HKC细胞中STAT3信号转导通路的活化,并进一步通过上调Bcl-2、下调Bax蛋白的表达,从而抑制细胞凋亡。
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| 关 键 词： | 信号转导与转录因子3 小干扰RNA 缺氧复氧 肾小管上皮细胞 |
Construction of the Vector Expressing Small Interference RNA TargetingSTAT3 Gene and its Effect on Apoptosis of Human Tubular EpithelialCells Induced by Hypoxia-Reoxygenation Injury* |
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| SI Yan-n,HAN Liu,CHENG Hao,LV Yun-luo,CAI Meng-meng,XIE Xin-yi,BAO Hong-guang. Construction of the Vector Expressing Small Interference RNA TargetingSTAT3 Gene and its Effect on Apoptosis of Human Tubular EpithelialCells Induced by Hypoxia-Reoxygenation Injury*[J]. Progress in Modern Biomedicine, 2014, 14(15): 2858-2862 |
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| Authors: | SI Yan-n HAN Liu CHENG Hao LV Yun-luo CAI Meng-meng XIE Xin-yi BAO Hong-guang |
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| Affiliation: | (Department of Anesthesiology, AflTliated Nanjing Hospital, Nanjing Medical University, Nanjing, Jiangsu, 210006, China ) |
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