甜菜(Beta vulearis L.)叶绿体转化体系建立及抗虫和抗除草剂植株的获得 |
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作者姓名: | 崔杰 李滨胜 杨谦 程大友 |
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作者单位: | [1]哈尔滨工业大学食品科学与工程学院,哈尔滨150090 [2]黑龙江省森林植物园,哈尔滨150040 [3]哈尔滨工业大学生命科学与工程系,哈尔滨150001 |
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摘 要: | 为建立外源基因甜菜叶绿体转化体系,利用分子生物学方法构建了包含有编码苏云金芽孢杆菌晶体蛋白基因Bt crylAc和编码膦丝菌素乙酰转移酶基因bar的甜菜叶绿体转化载体pSKARBt/bar,以甜菜叶绿体基因组中atpB/rbcL做同源片段,以甜菜叶绿体16S启动子和终止子为调控基因,以bar基因为筛选标记基因.基因枪法转化甜菜叶柄,经筛选获得抗性转基因植株.对转基因植株进行外源基因Bt crylAc和bar的PCR检测、DNA印迹分析,结果表明:外源基因Bt crylAc和bar确已导入到甜菜叶绿体基因组中.转基因植株除草剂抗性鉴定及其离体叶片虫试鉴定结果表明:转基因植株具有较强的杀虫活性和抗除草剂特性,表达了相应的蛋白质.研究结果还表明:bar基因在植物叶绿体转化中,既可以用作抗性基因,又可用作转化体筛选的标记基因.建立了甜菜叶绿体转化体系.
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关 键 词: | 甜菜 叶绿体转化 成基因 bar基因 同质化 |
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