| 人疱疹病毒7型pp85重组表达及抗体制备 |
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| 引用本文： | 徐建,姚堃,窦洁,许文嵘,尹全章,陈云,周锋. 人疱疹病毒7型pp85重组表达及抗体制备[J]. 微生物与感染, 2007, 2(2): 88-91 |
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| 作者姓名： | 徐建 姚堃 窦洁 许文嵘 尹全章 陈云 周锋 |
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| 作者单位： | 南京医科大学微生物与免疫学系,南京,210029;南京医科大学微生物与免疫学系,南京,210029;南京医科大学微生物与免疫学系,南京,210029;南京医科大学微生物与免疫学系,南京,210029;南京医科大学微生物与免疫学系,南京,210029;南京医科大学微生物与免疫学系,南京,210029;南京医科大学微生物与免疫学系,南京,210029 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金 , 江苏省自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的 制备人疱疹病毒7型(HHV-7)pp85蛋白及其抗体。方法 采用聚合酶链反应(PCR)方法自HHV-7型YY5分离株中扩增出pp85基因,经测序后构建原核表达质粒PGEX-6p-1+pp85b。重组质粒转化大肠埃希菌Rosetta,诱导蛋白表达。应用酶切鉴定、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及蛋白质印迹法等方法确保基因片段的正确性及表达蛋白的特异性。表达的蛋白经亲和层析纯化后,免疫动物制备多克隆抗体,并通过免疫荧光法鉴定抗体的特异性。结果 成功地获得了高纯度的pp85融合蛋白,纯度可达90%以上;免疫动物后制备的多克隆抗体效价可达1∶102400,该抗体能特异识别HHV-7抗原,而不与HHV-6反应。结论 获得高纯度的HHV-7pp85融合蛋白及其高效价的抗体,将进一步应用于临床检验。
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| 关 键 词： | 人疱疹病毒7型 pp85 基因表达 病毒抗体 |
| 修稿时间： | 2007-01-29 |
Cloning and expression of human herpesvirus 7 pp85 and corresponding antibody production |
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| XU Jian,YAO Kun,DOU Jie,XU Wen-rong,YIN Quan-zhang,CHEN Yun,ZHOU Feng. Cloning and expression of human herpesvirus 7 pp85 and corresponding antibody production[J]. Journal of Microbes and Infection, 2007, 2(2): 88-91 |
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| Authors: | XU Jian YAO Kun DOU Jie XU Wen-rong YIN Quan-zhang CHEN Yun ZHOU Feng |
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| Affiliation: | Department of Microbiology and Immunology, Nanjing Medical University, Nanjing 210029, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Human herpesvirus 7 pp85 Gene expression Viral antibodies |
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