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| 登革病毒2型全长cDNA感染性转录体的构建和鉴定 | |
| 引用本文： | 贡树基,赵 卫,张文炳,周 浩,陈丽丹,张复春,严子锵,曹 虹. 登革病毒2型全长cDNA感染性转录体的构建和鉴定[J]. 微生物学通报, 2009, 36(5): 0722-0727 |
| 作者姓名： | 贡树基 赵 卫 张文炳 周 浩 陈丽丹 张复春 严子锵 曹 虹 |
| 作者单位： | 1. 南方医科大学公共卫生与热带医学学院微生物学系,广东,广州,510515 2. 广州市第八人民医院,广东,广州,510060 3. 广州市疾病预防控制中心,广东,广州,510080 |
| 基金项目： | 广州市科技支撑计划项目(No. 2008Z1–E401); 广州市科技攻关计划重点项目(No. 2004Z2-E0214) |
| 摘 要： | 为构建登革病毒感染性克隆, 针对登革病毒2型基因组全长cDNA的体外转录方法及感染性转录体进行研究。采用长链RT-PCR技术, 扩增DEN2 NGC株全长基因组cDNA, 以之为模板, 用SP6 RNA聚合酶系统制备体外转录RNA转录体, 分别经乳鼠脑内接种及电穿孔转染BHK-21细胞, 观察其感染效应。并从受染鼠脑和病变细胞中提取总RNA, 进行RT-PCR扩增、克隆测序以及电镜观察。结果发现, 从感染鼠脑和细胞中经RT-PCR均可扩增出病毒特异的基因片段, 大小与预期一致; 并从乳鼠脑组织和BHK-21细胞中观察到恢复病毒颗粒。上述结果表明本文成功构建的DEN2 NGC株病毒全长cDNA的体外转录体具有感染性, 乳鼠脑内接种途径与电穿孔转染细胞一样可成为体外转录体感染宿主细胞、获得恢复病毒的方法。 |
| 关 键 词： | 登革2型病毒 全长cDNA 感染性转录体 |
Construction of Infectious RNA Transcripts from Full-length cDNAs of Dengue 2 Viruse |
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| GONG Shu-Ji,ZHAO Wei,ZHANG Wen-Bing,ZHOU Hao,CHEN Li-Dan,ZHANG Fu-Chun,YAN Zi-Qiang and CAO Hong. Construction of Infectious RNA Transcripts from Full-length cDNAs of Dengue 2 Viruse[J]. Microbiology China, 2009, 36(5): 0722-0727 | |
| Authors: | GONG Shu-Ji ZHAO Wei ZHANG Wen-Bing ZHOU Hao CHEN Li-Dan ZHANG Fu-Chun YAN Zi-Qiang CAO Hong |
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| Keywords: | |
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