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沼气池宏基因组文库中未培养微生物β-葡萄糖苷酶基因的克隆与鉴定
引用本文:唐咸来,车志群,李双喜,蒋建林,罗奉奉,武 波.沼气池宏基因组文库中未培养微生物β-葡萄糖苷酶基因的克隆与鉴定[J].广西植物,2008,28(6):790-794.
作者姓名:唐咸来  车志群  李双喜  蒋建林  罗奉奉  武 波
作者单位:1. 广西大学,生命科学与技术学院,南宁,530005;广西壮族自治区科学技术厅,南宁,530005
2. 广西大学,生命科学与技术学院,南宁,530005;广西亚热带生物资源保护利用重点实验室,南宁,530005;微生物及植物遗传工程教育部重点实验室,南宁,530005
摘    要:以间接提取法提取了沼气池样品的微生物宏基因组DNA,用柯斯质粒载体pWEB:TNC构建了一个含三万个克隆的沼气池宏基因组文库,对文库中的克隆随机分析表明,该文库的外源片段平均长度为40 kb,文库的总容量为1 .2×106kb。对其中的一个在七叶苷平板上显色的阳性克隆pGXN100进行进一步亚克隆、测序和序列分析。结果表明,pGXN100上有一个全长为1 863bp的ORF,编码621个氨基酸组成的蛋白质。将该基因命名为Unglu100。与产气克雷伯菌属的一个β-葡萄糖苷酶基因AN292在核苷酸和氨基酸水平上分别有76%和85%的同源性,利用SMART软件进行预测表明,Unglu100可能是PTS中β-葡萄糖苷酶特异性的转运蛋白组件。

关 键 词:沼气池  宏基因组文库  β-葡萄糖苷酶
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