| 鸡gga-miR-7b靶基因VDAC1-3’UTR双荧光素酶报告基因质粒的构建 |
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| 引用本文： | 肖春婷,廉传江,易诚,陈洪岩.鸡gga-miR-7b靶基因VDAC1-3’UTR双荧光素酶报告基因质粒的构建[J].基因组学与应用生物学,2020,39(2):533-538. |
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| 作者姓名： | 肖春婷 廉传江 易诚 陈洪岩 |
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| 作者单位： | 东北农业大学生命科学学院,哈尔滨,150030;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室,哈尔滨,150069;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室,哈尔滨,150069;东北林业大学生命科学学院,哈尔滨,150040 |
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| 摘 要： | 本研究以鸡gga-miR-7b作为研究对象,为了明确与肿瘤形成相关的关键基因VDAC1(Voltage-dependent anion channel 1)是否为gga-miR-7b的靶基因,深入研究gga-miR-7b对VDAC1基因的调控作用,本研究运用TargetScan和miRBD生物学软件预测了gga-miR-7b与VDAC1 m RNA的3’端非编码区(3’UTR)存在种子结合位点(GTCTTCC),并使用PCR克隆以及同源重组突变的方法构建VDAC1-3’UTR野生型和突变型双荧光素酶报告基因重组质粒,经SacⅠ和XbaⅠ双酶切鉴定及测序结果显示,片段大小符合且序列正确;成功构建了VDAC1-3’UTR野生型和突变型双荧光素酶报告基因重组质粒并命名为pmirGLOVDAC1-wt3’UTR和pmirGLO-VDAC1-mut3’UTR。本研究结果进一步为gga-miR-7b候选靶基因VDAC1的鉴定以及功能研究提供理论依据。
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| 关 键 词： | 马立克氏病 gga-miR-7b VDAC1基因 pmirGLO-VDAC1-wt-3’UTR pmirGLO-VDAC1-mut-3’UTR |
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