| 重组枯草芽孢杆菌发酵生产乳铁蛋白N叶工艺优化北大核心CSCD |
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| 引用本文： | 金亮,李利宏,张荣珍,徐岩.重组枯草芽孢杆菌发酵生产乳铁蛋白N叶工艺优化北大核心CSCD[J].生物工程学报,2022,38(7):2628-2638. |
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| 作者姓名： | 金亮 李利宏 张荣珍 徐岩 |
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| 作者单位： | 江南大学 生物工程学院 酿酒与应用酶学实验室, 江苏 无锡 214122 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31970045) |
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| 摘 要： | 为实现乳铁蛋白N叶的大规模制备,本研究对表达乳铁蛋白N叶的工程菌枯草芽孢杆菌pMA0911-D60Y/Y92D进行了发酵工艺的优化。确定了最佳的培养条件:以葡萄糖为最佳碳源,以胰蛋白胨为最佳氮源,在pH 7.0、温度28℃、发酵25.5 h条件下诱导表达目的蛋白,目的蛋白的IOD值高达68.03%。在10L发酵罐上对重组菌株的发酵条件进行优化,获得如下的最佳发酵工艺,即采用300 r/min转速,0-7 h时,在pH 7.5、30℃条件下培养菌体;7-25 h时,在pH 7.0、28℃条件下诱导表达目的蛋白。发酵结束后,收集细胞并破碎后取上清液用HisTrapHP亲和层析及SuperdexTM200(10/300GL)亲和层析法对细胞上清液进行纯化至均一条带,获得了纯度>94%的重组乳铁蛋白N叶,1 L菌体能制备23.5 mg纯蛋白。本研究为重组牛乳铁蛋白N-叶的高效制备奠定了基础。
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| 关 键 词： | 牛乳铁蛋白N叶 枯草芽孢杆菌 蛋白表达与纯化 发酵工艺优化 响应面分析 |
| 收稿时间： | 2021/9/13 0:00:00 |
Fermentation optimization for production of lactoferrin N-lobe by recombinant Bacillus subtilis |
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| JIN Liang,LI Lihong,ZHANG Rongzhen,XU Yan.Fermentation optimization for production of lactoferrin N-lobe by recombinant Bacillus subtilis[J].Chinese Journal of Biotechnology,2022,38(7):2628-2638. |
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| Authors: | JIN Liang LI Lihong ZHANG Rongzhen XU Yan |
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| Institution: | Laboratory of Brewing Microbiology and Applied Enzymology, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | bovine lactoferrin N-lobe Bacillus subtilis protein expression and purification fermentation process optimization response surface analysis |
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