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| 毕赤酵母发酵生产颗粒性乙肝表面抗原的条件优化 | |
| 引用本文： | 刘如石,林亲录,孙意,邱义兰,徐甜,丁海,郭向荣.毕赤酵母发酵生产颗粒性乙肝表面抗原的条件优化[J].生物工程学报,2008,24(12):2098-2105. |
| 作者姓名： | 刘如石 林亲录 孙意 邱义兰 徐甜 丁海 郭向荣 |
| 作者单位： | 1. 湖南师范大学生命科学学院,微生物分子生物学湖南省重点实验室,长沙,410081 2. 中南林业科技大学食品科学与工程学院,长沙,410078 3. 中南大学湘雅二医院,长沙,410004 |
| 基金项目： | 湖南省自然科学基金(Nos. 08JJ3082, 07JJ5048)资助。 |
| 摘 要： | 乙型肝炎病毒的流行对人们的生命健康造成了极大的威胁, 而有效准确的诊断和预防性疫苗是阻止其流行的主要手段, 乙肝表面抗原是诊断试剂和疫苗的主要成分。本试验在构建稳定表达HBsAg的毕赤酵母菌株后, 对其发酵条件进行了研究。采用摇瓶分批培养方法, 探讨了不同培养基、溶解氧、诱导物甲醇的浓度以及pH值等因素对菌体生长与重组蛋白表达的影响。在10 L发酵罐上采用分批补料培养的方法研究了进行扩大培养生产重组HBsAg。结果表明, FBS无机盐合成培养基是理想的工业发酵培养基, 溶解氧对菌体的生长与表达有显著的影响, 甲醇诱导最佳终浓度为1% (V/V), 发酵的最适pH值为5.4~6.0。发酵罐放大培养后, ELISA和 SDS-PAGE分析表明重组HBsAg获得了高效表达, 最终菌体生物量达到310 OD600, 表达量达到27 mg/L。电子显微镜观察表达重组乙肝抗原可以自组装为22 nm类病毒颗粒, 为HBV的新一代早期血清学诊断和疫苗的大规模生产提供了一定的参考。 |
| 关 键 词： | 发酵参数 高表达 优化筛选 毕赤酵母 重组乙肝表面抗原 |
| 收稿时间： | 2008/5/10 0:00:00 |
Optimization of Fermentation Conditions for Maximal Recombinant Hepatitis B Surface Antigen Particle Production in Pichia pastoris |
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| Rushi Liu,Qinlu Lin,Yi Sun,Yilan Qiu,Tian Xu,Hai Ding and Xiangrong Guo.Optimization of Fermentation Conditions for Maximal Recombinant Hepatitis B Surface Antigen Particle Production in Pichia pastoris[J].Chinese Journal of Biotechnology,2008,24(12):2098-2105. | |
| Authors: | Rushi Liu Qinlu Lin Yi Sun Yilan Qiu Tian Xu Hai Ding and Xiangrong Guo |
| Institution: | Colleges of Life Sciences, Hunan Normal University, Key Laboratory of Microbial Molecular of Hunan Province, Chnagsha 410081, China;Colleges of Food Science and Engineering, Central South University of Forestry and Technology, Changsha 410078, China;Xiangya Second Hospital, Central South University, Changsha 410004, China;Colleges of Life Sciences, Hunan Normal University, Key Laboratory of Microbial Molecular of Hunan Province, Chnagsha 410081, China;Colleges of Life Sciences, Hunan Normal University, Key Laboratory of Microbial Molecular of Hunan Province, Chnagsha 410081, China;Colleges of Life Sciences, Hunan Normal University, Key Laboratory of Microbial Molecular of Hunan Province, Chnagsha 410081, China;Colleges of Life Sciences, Hunan Normal University, Key Laboratory of Microbial Molecular of Hunan Province, Chnagsha 410081, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | fermentation parameters high-throughput optimization screening Pichia pastoris recombinant hepatitis B surface antigen (HBsAg) |
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