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代谢相关酶过表达对CHO细胞瞬时表达anti-hLAG3的影响
引用本文:刘立苹,杨昭,沈宗毅,喻长远.代谢相关酶过表达对CHO细胞瞬时表达anti-hLAG3的影响[J].生物工程学报,2021,37(1):312-320.
作者姓名:刘立苹  杨昭  沈宗毅  喻长远
作者单位:北京化工大学 生命科学与技术学院,北京 100029
基金项目:国家“重大新药创制”科技重大专项 (No. 2019ZX09721001-007) 资助。
摘    要:为提高CHO细胞重组蛋白表达量,对比研究了过表达代谢相关酶丙酮酸羧化酶 (PYC2)、苹果酸酶Ⅱ (MDH2)、丙氨酸转氨酶1 (ALT1)、鸟氨酸转氨甲酰酶 (OTC)、氨基甲酰磷酸合成酶Ⅰ (CPSⅠ) 和代谢相关蛋白牛磺酸转运蛋白 (TAUT) 及透明颤菌血红蛋白 (VHb) 对ExpiCHO-S瞬时表达anti-hLAG3的影响。结果表明,过表达上述7种蛋白均能不同程度提高抗体产量。其中,过表达OTC、CPSI、MDH2和PYC2分别能够使ExpiCHO-S抗体产量提高29.2%、27.6%、24.1%和20.3%。并且,过表达OTC和MDH2能够明显提高细胞培养初期的抗体生产速率,提前4 d达到与对照组相近的抗体产量。过表达OTC和MDH2对anti-hLAG3对抗原的亲和力基本无影响。大多数情况下,7种蛋白对细胞生长基本无影响。此外,过表达MDH2和ALT1同样能够提高H293T细胞的抗体产量。总的来说,代谢相关蛋白的过表达可以应用于瞬时表达系统,提高哺乳动物细胞的抗体产量。

关 键 词:代谢相关酶,CHO细胞,瞬时表达,anti-hLAG3,细胞工程
收稿时间:2020/5/3 0:00:00

Impact of metabolic enzymes overexpression on transient expression of anti-hLAG3 by CHO cells
Liping Liu,Zhao Yang,Zongyi Shen,Changyuan Yu.Impact of metabolic enzymes overexpression on transient expression of anti-hLAG3 by CHO cells[J].Chinese Journal of Biotechnology,2021,37(1):312-320.
Authors:Liping Liu  Zhao Yang  Zongyi Shen  Changyuan Yu
Institution:College of Life Science and Technology, Beijing University of Technology, Beijing 100029, China
Abstract:
Keywords:metabolic enzymes  CHO cells  transient expression  anti-hLAG3  cell engineering
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