苏云金杆菌6-内毒素基因及3’末端缺失基因在大肠杆菌和农杆菌中的亚克隆和表达 |
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作者姓名: | 郭三堆 陈学军 杨虹 范云六 |
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作者单位: | 中国农业科学院生物技术研究中心,分子生物学室,北京 |
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摘 要: | 苏云金芽孢杆菌交种Bacillus thuringiensis aizawai 7-29 δ-内毒素基因及其3,末端缺失基因,亚克隆到质粒pUCl9上,构建了Pucf33和Puck63重组质粒。进一步将δ-内毒素基因及其3’端缺失基因,插入到植物表达载pBl121.2质粒中,构建了Pgy61和Pgyck63重组质粒。.用32P标记的δ-内毒素3’末端缺失的KpnI DNA片段的探针,与重组质粒进行DNA—DNA分子杂交,结果阳性。带有全长和3’末端缺失重组质粒,转入大肠杆菌HB101和农杆菌LA4404受体细胞中,其克隆子细胞抽提物,对大菜粉蝶和玉米螟幼虫均具有杀虫生物活性。结果证明δ-内毒素基因不仅能在大肠杆菌HB10l中,而且能在农杆菌LA4404中表达。
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关 键 词: | δ-内毒素基因;亚克隆;重组质粒缺失;苏云金芽孢杆菌 |
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