苏云金杆菌6－内毒素基因及3’末端缺失基因在大肠杆菌和农杆菌中的亚克隆和表达

苏云金芽孢杆菌交种Bacillus thuringiensis aizawai 7-29 δ-内毒素基因及其3，末端缺失基因，亚克隆到质粒pUCl9上，构建了Pucf33和Puck63重组质粒。进一步将δ-内毒素基因及其3’端缺失基因，插入到植物表达载pBl121．2质粒中，构建了Pgy61和Pgyck63重组质粒。．用32P标记的δ-内毒素3’末端缺失的KpnI DNA片段的探针，与重组质粒进行DNA—DNA分子杂交，结果阳性。带有全长和3’末端缺失重组质粒，转入大肠杆菌HB101和农杆菌LA4404受体细胞中，其克隆子细胞抽提物，对大菜粉蝶和玉米螟幼虫均具有杀虫生物活性。结果证明δ－内毒素基因不仅能在大肠杆菌HB10l中，而且能在农杆菌LA4404中表达。