利用PCR技术鉴别转化根癌农杆菌中外源和内源的GUS基因

利用ＰＣＲ技术鉴别转化根癌农杆菌中外源和内源的ＧＵＳ基因刘颖，金振华（中国科学院发育生物学研究所，北京１０００８０）林忠平（中国科学院植物研究所，北京１０００４４）利用ＧＵＳ编码区引物，分别以取自根癌农杆菌ＬＢＡ４４０４及整合ＧＵＳ融合基因的Ｔｉ质粒为模板，通过ＰＣＲ扩增并用琼脂糖凝胶电泳鉴定其产物。结果表明，两种模板的扩增物都含有对应于ＧＵＳ编码区的１．８ｋｂ条带，证明农杆菌ＬＢＡ４４０４本身含有GUS基因(内源),但是基因和GUS融合基因(外源)的GUS编码序列对BamHI作用的反应不同,据此可将二者区分开来。