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bm47基因缺失对家蚕核型多角体病毒(BmNPV)复制及转录的影响分析
引用本文:张臣,朱桢楠,袁佳,石扬辉,陈健,聂作明,吕正兵,张耀洲,于威.bm47基因缺失对家蚕核型多角体病毒(BmNPV)复制及转录的影响分析[J].病毒学报,2014,30(3).
作者姓名:张臣  朱桢楠  袁佳  石扬辉  陈健  聂作明  吕正兵  张耀洲  于威
作者单位:浙江理工大学生物化学研究所,杭州310018;浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室,杭州310018;浙江理工大学生物化学研究所,杭州310018;浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室,杭州310018;浙江理工大学生物化学研究所,杭州310018;浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室,杭州310018;浙江理工大学生物化学研究所,杭州310018;浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室,杭州310018;浙江理工大学生物化学研究所,杭州310018;浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室,杭州310018;浙江理工大学生物化学研究所,杭州310018;浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室,杭州310018;浙江理工大学生物化学研究所,杭州310018;浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室,杭州310018;浙江理工大学生物化学研究所,杭州310018;浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室,杭州310018;浙江理工大学生物化学研究所,杭州310018;浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室,杭州310018
基金项目:国家高技术研究发展计划“863”项目(No.2011AA100603)
摘    要:家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori Nucleopolyhedrovirus,BmNPV)bm47基因普遍存在于已测序的鳞翅目核型多角体病毒基因组中,是杆状病毒的核心基因之一,但其在病毒复制及转录过程中的具体功能尚未可知。本研究利用Red重组技术在大肠杆菌BW25113中构建了BmNPV的bm47基因缺失型病毒bm47-ko-Bacmid,并利用Bac-to-Bac系统构建了bm47基因的补回型病毒bm47-re-Bacmid。然后利用TCID50病毒滴度测定法和荧光定量PCR等方法研究了缺失bm47基因对病毒复制、转录及蛋白表达的影响。结果表明,bm47基因缺失后对病毒基因组的复制水平没有明显的影响;在病毒转染BmN细胞后48h和72h两个时相,bm47基因的缺失导致病毒早期基因lef3、晚期基因vp39以及极晚期基因p10的转录水平均有一定程度的下降。本研究工作将为深入研究BmNPV bm47在病毒复制和基因转录过程中的生物学功能奠定基础。

关 键 词:BmNPV  bm47  基因敲除  病毒复制  病毒基因转录
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