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| SARS-CoV Sars7a和EGFP融合蛋白真核表达载体构建及其表达 | |
| 引用本文： | 何贤辉,徐丽慧,刘毅,蔡小嫦,曾耀英. SARS-CoV Sars7a和EGFP融合蛋白真核表达载体构建及其表达[J]. 中国病毒学, 2004, 19(3): 209-213 |
| 作者姓名： | 何贤辉 徐丽慧 刘毅 蔡小嫦 曾耀英 |
| 作者单位： | 1. 暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室,广东,广州,510632 2. 暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室,广东,广州,510632;暨南大学生物工程研究所,广东,广州,510632 3. 暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室,广东,广州,510632;郑州大学第一附属医院皮肤科,河南郑州,450052 4. 暨南大学第一附属医院皮肤科,广东广州,510632 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金重点项目(No.30230350);国家重点基础研究发展规划"973"项目(No.G200057006);暨南大学SARS攻关基金和暨南大学自然科学基金资助 |
| 摘 要： | 根据SARS-CoV sars7a基因设计并化学合成部分重叠引物,经二轮PCR获得sars7a基因片段,以此片段为模板并利用一对带有Kozak序列及删除终止密码的引物进行PCR,获得产物与pEGFP-N1载体连接,使sars7a基因位于EGFP的基因上游,得到含编码Sars7a-EGFP融合蛋白基因的哺乳动物细胞表达载体.采用细胞核转染技术将重组表达载体转染K562细胞,以流式细胞仪和共聚焦显微镜分析,可检测到EGFP的绿色荧光,表明Sars7a-EGFP得到表达,该蛋白分布于整个细胞,提示Sars7a并非膜蛋白,更可能是胞浆蛋白.此外,该蛋白的表达对K562细胞凋亡无明显影响. |
| 关 键 词： | 严重急性呼吸综合征 冠状病毒 Sars7a 绿色荧光蛋白 融合蛋白 表达 |
| 文章编号： | 1003-5152(2004)03-0209-05 |
| 修稿时间： | 2003-11-10 |
Construction of an Eukaryotic Expression Vector for SARS-CoV Sars7a and EGFP Fusion Protein Expression |
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| HE Xian-hui,XU Li-hui,LIU Yi,CAI Xiao-chang,ZENG Yao-ying. Construction of an Eukaryotic Expression Vector for SARS-CoV Sars7a and EGFP Fusion Protein Expression[J]. Virologica Sinica, 2004, 19(3): 209-213 | |
| Authors: | HE Xian-hui XU Li-hui LIU Yi CAI Xiao-chang ZENG Yao-ying |
| Affiliation: | 1.1. Key Laboratory of Tissue Transplantation and Immunology, Ministry of Education, Jinan University, Guangzhou 5106322.Institute of Bioengineering, Jinan University, Guangzhou 5106323.Department of Dermatology, the First Affiliated Hospital, Jinan University，Guangzhou 510632, China4.Department of Dermatology, the First Affiliated Hospital, Zhengzhou University, Zhengzhou 450052, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | Severe acute respiratory syndrome Coronavirus Sars7a Green fluorescent protein Fusion protein Expression |
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