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烤烟品种南江3号均一化全长cDNA文库构建
引用本文:蔡刘体,胡重怡,张永春,韩晓红.烤烟品种南江3号均一化全长cDNA文库构建[J].生物技术,2011,21(2).
作者姓名:蔡刘体  胡重怡  张永春  韩晓红
作者单位:贵州省烟草科学研究所,贵州,贵阳550018
基金项目:贵州省烟草专卖局项目,国家烟草专卖局项目
摘    要:目的:为了获得功能基因的信息,构建烤烟品种南江3号的均一化cDNA文库.方法:用RNeasy Plant Mini Kit提取烤烟南江3号叶片和花的RNA,用反转录酶逆转录合成第一链eDNA.以LD-PCR扩增获得的双链cDNA为模板,采用基于双链特异性核酸酶(Duplex-Specific Nuclease,DSN)的均一化cDNA文库技术,构建南江3号盛花期的均一化cDNA文库.结果:构建了南江3号盛花期的均一化cDNA文库,文库重组率大为97.47%,库容量约为1.26×10<'6>,插入片段平均长度大于1.2kb.从文库中随机48个克隆进行PCR检测,挑取20个克隆进行测序,序列通过BLAST比对结果显示文库可能包含大量基因和ESTs序列.结论:该文库为研究南江3号的基因功能和资源提供材料来源.

关 键 词:烤烟  基因  均一化  cDNA文库  表达序列标签

Construction Normalized Full-length cDNA library of Flue-cured Tobacco Variety of Nanjiang-3
CAI Liu-ti,HU Zhong-yi,ZHANG Yong-chun,HAN Xiao-hong.Construction Normalized Full-length cDNA library of Flue-cured Tobacco Variety of Nanjiang-3[J].Biotechnology,2011,21(2).
Authors:CAI Liu-ti  HU Zhong-yi  ZHANG Yong-chun  HAN Xiao-hong
Abstract:
Keywords:
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