| 扩增和纯化携带肌浆网钙ATP酶重组腺病毒的实验方法 |
| |
| 引用本文： | 范平,魏琴,段明军,侯月梅. 扩增和纯化携带肌浆网钙ATP酶重组腺病毒的实验方法[J]. 生物技术, 2011, 21(2). DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2011.02.048 |
| |
| 作者姓名： | 范平 魏琴 段明军 侯月梅 |
| |
| 作者单位： | 新疆医科大学第一附属医院,新疆,乌鲁木齐830054 |
| |
| 基金项目： | 新疆维吾尔自治区自然科学基金项目 |
| |
| 摘 要： | 目的:通过扩增和纯化rAd.SERCA2a,为转SERCA2a基因研究提供实验基础,并为建立基因库提供稳定可靠的实验方法.方法:用100μL 1.9×10<'12>pfu/ml rAd.SERCA2a感染HEK293细胞,出现细胞病变效应时收获细胞,经物理反复冻融方法及两步氯化铯超速离心方法获得纯化的rAd.SERCA2a,紫外分光光度计比色法测定病毒DNA质粒数.结果:rAd.SERCA2a成功在HEK293细胞表达呈现绿色荧光,纯化的rAd-SERCA2a-GFP DNA质粒数为1.3±0.58×10<'12>pfu/mL,OD<,260>/OD<,280>比值为1.57±0.49(n=50).结论:建立了稳定可靠的借助HEK293细胞培养扩增rAd.SERCA2a的实验方法,纯化后的高效价的SERCA2a基因的重组腺病毒可直接用于心力衰竭的实验研究,对重组腺病毒携带其他基因的扩增与提纯方法也具有一定的参考价值.
|
| 关 键 词： | HEK293细胞 腺病毒 扩增 纯化 |
Experimental Method on Amplification and Purification of Adenovirus Mediated Sarcoplasmicreticulum Ca2+ ATPase |
| |
| FAN Ping,WEI Qin,DUAN Ming-jun,HOU Yue-mei. Experimental Method on Amplification and Purification of Adenovirus Mediated Sarcoplasmicreticulum Ca2+ ATPase[J]. Biotechnology, 2011, 21(2). DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2011.02.048 |
| |
| Authors: | FAN Ping WEI Qin DUAN Ming-jun HOU Yue-mei |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | SERCA2a |
| 本文献已被 万方数据 等数据库收录！ |
|
