| 大肠杆菌中1,3-丙二醇氧化还原酶的表达与纯化 |
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| 引用本文： | 刘海平,郝健. 大肠杆菌中1,3-丙二醇氧化还原酶的表达与纯化[J]. 生物技术, 2011, 21(1). DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2011.01.007 |
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| 作者姓名： | 刘海平 郝健 |
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| 作者单位： | 燕山大学,环境与化学工程学院,河北,秦皇岛,066004 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，"教育部留学回国人员科研启动基金 |
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| 摘 要： | 目的:在大肠杆菌中表达1,3-丙二醇氧化还原酶(PDOR),并对PDOR进行纯化.方法:从克雷伯氏肺炎杆菌(Klebsiella pneumoniae)基因组中,克隆PDOR基因dhaT.构建表达载体pDK-dhaT,在E.coli DH5α中利用IPTG诱导进行表达.细胞裂解液利用硫酸铵盐析、Sephadex G-200凝胶层析和DE23 Cellulose阴离子交换层析,进行酶蛋白分离提纯.结果:用SDS-PAGE分析表明胞内PDOR占可溶性蛋白的39.8%,酶活为14.5U/ml.纯化后酶液比酶活提高3.94倍,回收率为15.5%.结论:成功地构建了PDOR高效表达载体,并且得到了高纯度的PDOR.
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| 关 键 词： | 1,3-丙二醇氧化还原酶 克隆 表达 纯化 |
Over-expression of Klebsiella pneumoniae 1,3-Propanediol Oxidoreductase Gene dhaT in Escherichia coli and Purification of the Protein |
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| LIU Hai-ping,HAO Jian. Over-expression of Klebsiella pneumoniae 1,3-Propanediol Oxidoreductase Gene dhaT in Escherichia coli and Purification of the Protein[J]. Biotechnology, 2011, 21(1). DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2011.01.007 |
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| Authors: | LIU Hai-ping HAO Jian |
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