| 水牛睾丸特异LDHC基因的原核表达及生物学活性研究 |
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| 引用本文： | 洪键,石云,吴生才,王加连,刘忠权.水牛睾丸特异LDHC基因的原核表达及生物学活性研究[J].生物技术,2011,21(2). |
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| 作者姓名： | 洪键 石云 吴生才 王加连 刘忠权 |
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| 作者单位： | 1. 盐城师范学院江苏省滩涂生物资源与环境保护重点建设实验室,江苏盐城,224002
2. 盐城卫生职业技术学院,江苏,盐城224006 |
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| 基金项目： | 江苏省滩涂生物资源与环境保护重点建设实验室开放课题，盐城师范学院自然科学基金项目 |
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| 摘 要： | 目的:克隆水牛睾丸特异Ldhc基因全长在大肠杆菌中原核表达,研究其生物学活性.方法:以水牛睾丸组织为材料提取总RNA,RT-PCR扩增Ldhc cDNA,PCR获得水牛全长Ldhc基因;连接pET-32b构建表达质粒pET-32b-Ldhc;转化BL21(DE3)大肠杆菌,IPTG诱导表达并利用SDS-PAGE分析.体外Ni离子柱纯化目的蛋白,Western印迹鉴定其抗体结合活性,同工酶谱鉴定其生物学活性.结果:成功制备了表达质粒pET-32b-Ldhc;IPTG诱导得到56KDa目的蛋白;Ni柱纯化获得纯度90%以上的蛋白;Western印迹显示目的蛋白具有特异的抗体结合活性;同工酶活性染色证明其具有乳酸脱氢酶活性.结论:试验成功制备了水牛睾丸LDH-CA蛋白,并初步验证了其生物学活性,为我们进一步探讨LDH-G4的功能及免疫节育疫苗的制备等奠定了基础.
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| 关 键 词： | 原核表达 生物学活性 |
Prokaryotic Expression and Biological Activity Analysis of Buffalo Testicles LDH-C Gene |
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| HONG Jian,SHI Yun,WU Sheng-cai,WANG Jia-lian,LIU Zhong-quan.Prokaryotic Expression and Biological Activity Analysis of Buffalo Testicles LDH-C Gene[J].Biotechnology,2011,21(2). |
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| Authors: | HONG Jian SHI Yun WU Sheng-cai WANG Jia-lian LIU Zhong-quan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | LDHC |
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