| 人DC-SIGN真核表达载体的构建及其在A549细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 吕佰瑞,刘朝奇,李斌,姚佳红.人DC-SIGN真核表达载体的构建及其在A549细胞中的表达[J].生物技术,2011,21(1). |
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| 作者姓名： | 吕佰瑞 刘朝奇 李斌 姚佳红 |
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| 作者单位： | 三峡大学分子生物学研究所,湖北,宜昌,443002 |
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| 基金项目： | 湖北省卫生厅青年科技人才基金 |
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| 摘 要： | 目的:构建人DC-SIGN基因真核表达质粒,观察其在人肺腺癌细胞A549中的表达.为进一步研究DC-SIGN的作用奠定实验基础.方法:用PCR的方法扩增编码DC-SIGN的基因序列,将其克隆到真核表达载体pCDNA中,酶切及测序鉴定重组质粒.将构建的重组质粒转染到A549细胞中,用Western Blotting和免疫荧光等方法检测DC-SIGN基因的表达.结果: 从人cDNA文库中得到1 215bp的DC-SIGN序列后,重组到pCDNA载体中,经酶切及测序鉴定,成功构建pCDNA-DC-SIGN重组质粒.重组质粒转染A549细胞,经Western blotting检测,发现在约55kDa处有特异条带,与理论大小相符.应用免疫荧光技术检测DC-SIGN可在A549细胞内的表达.荧光显示Myf5蛋白定位在细胞浆中.建立表达DC-SIGN的细胞株.结论:成功构建了人DC-SIGN的真核表达载体,并建立了人DC-SIGN的真核表达细胞株.
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| 关 键 词： | DC-SIGN基因 真核表达 免疫荧光 |
Construction of Eukaryotic Expression Vector of DC-SIGN and Its Expression in A549 Cells |
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| LV Bai-rui,LIU Chao-qi,LI Bin,YAO Jia-hong.Construction of Eukaryotic Expression Vector of DC-SIGN and Its Expression in A549 Cells[J].Biotechnology,2011,21(1). |
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| Authors: | LV Bai-rui LIU Chao-qi LI Bin YAO Jia-hong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Western blotting |
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