| 小菜蛾NanosO基因启动子的克隆及功能验证 |
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| 引用本文： | 王亚军,黄宇萍,于慧慧,徐雪娇,杨广,艾倩倩,尤民生.小菜蛾NanosO基因启动子的克隆及功能验证[J].昆虫学报,2018,61(12):1376-1383. |
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| 作者姓名： | 王亚军 黄宇萍 于慧慧 徐雪娇 杨广 艾倩倩 尤民生 |
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| 作者单位： | (1. 福建农林大学生命科学学院, 闽台作物有害生物生态防控国家重点实验室, 福州 350002; 2. 福建农林大学应用生态研究所, 福州 350002; 3. 福建农林大学, 教育部害虫生态防控国际合作联合实验室, 福州 350002) |
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| 摘 要： | 【目的】克隆小菜蛾Plutella xylostella NanosO基因PxnosO启动子，并验证其具有生殖腺特异性活性，以期应用于基因功能研究或转基因昆虫的构建,为小菜蛾等农业害虫的综合治理提供新的研究思路。【方法】根据小菜蛾基因组序列信息，利用PCR技术克隆NanosO的启动子并进行序列分析。构建PxnosO-EGFP表达质粒，利用脂质体细胞转染技术将PxnosO-EGFP和IE1-EGFP表达质粒转入到小菜蛾胚胎细胞系(Px-6)和草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda卵巢细胞系(Sf9)中，通过激光共聚焦荧光显微镜观察和qRT-PCR技术分别定性和定量分析EGFP基因的表达，验证小菜蛾NanosO启动子的活性。【结果】克隆获得小菜蛾PxnosO (Px004767)启动子区序列，长1 743 bp。对启动子序列进行分析，发现该序列不仅包含启动子共有核心元件TATA box以及上游启动子成分CAAT box和GC box等，还包含有数十个转录因子结合位点。利用细胞转染技术，在PxnosO启动子驱动下成功地在Px-6和Sf9细胞系中表达外源基因EGFP。【结论】克隆了小菜蛾NanosO基因PxnosO启动子，在细胞水平上验证其能驱动外源EGFP基因的表达，为分析PxnosO在小菜蛾不同发育时期的表达模式和PxnosO启动子在体内的功能验证奠定基础。
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| 关 键 词： | style="font-family:宋体 小菜蛾" target="_blank">">小菜蛾 NanosO style="font-family:宋体 生殖腺特异性启动子" target="_blank">">生殖腺特异性启动子 style="font-family:宋体 表达质粒" target="_blank">">表达质粒 style="font-family:宋体 细胞转染" target="_blank">">细胞转染 |
Cloning and functional characterization of the NanosO gene promoter in Plutella xylostella (Lepidoptera: Noctuidae) |
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| WANG Ya-Jun,HUANG Yu-Ping,YU Hui-Hui,XU Xue-Jiao,YANG Guang,AI Qian-Qian,YOU Min-Sheng.Cloning and functional characterization of the NanosO gene promoter in Plutella xylostella (Lepidoptera: Noctuidae)[J].Acta Entomologica Sinica,2018,61(12):1376-1383. |
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| Authors: | WANG Ya-Jun HUANG Yu-Ping YU Hui-Hui XU Xue-Jiao YANG Guang AI Qian-Qian YOU Min-Sheng |
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| Institution: | (1. State Key Laboratory for Ecological Pest Control of Fujian/Taiwan Crops, College of Life Science, Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002, China; 2. Institute of Applied Ecology, FujianAgriculture andForestryUniversity,Fuzhou350002,China; 3. Joint International Research Laboratory of Ecological Pest Control, Ministry of Education,FujianAgriculture andForestryUniversity,Fuzhou350002,China) |
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| Abstract: | |
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